1、桂枝甘草龍骨牡蠣湯顆粒是由桂枝、炙甘草、龍骨、煅牡蠣四味藥組成，具有鎮(zhèn)靜安神，收斂固澀之功效，臨床上用于治療心陽虛所致的心悸、心煩、失眠、胸悶、身躁、乏力、精神萎靡見上述癥候者。本課題為新藥中藥天然藥物注冊分類六類[1]，是以中醫(yī)藥理論為指導，應用現代制藥技術和方法，對桂枝甘草龍骨牡蠣湯顆粒的藥學及毒理進行了系統(tǒng)的實驗研究，確保制備工藝科學合理，藥品制劑安全有效、質量穩(wěn)定可控。
　　 一、立題依據
　　 本方來源于《傷寒

2、論》中的經方桂枝甘草龍骨牡蠣湯《傷寒論》118條:“火逆下之，因燒針煩躁者，桂枝甘草龍骨牡蠣湯主之。”桂枝一兩（去皮），甘草二兩（炙），牡蠣二兩（熬），龍骨二兩。上四味，以水五升，煮取二升半去滓。溫服八合，日三服[2]。
　　 本方中桂枝溫通心陽，和暢心氣，炙甘草溫補心氣，與桂枝相用，溫陽補陽;龍骨鎮(zhèn)靜安神，使神明內守，煅牡蠣潛鎮(zhèn)浮陽之躁動，與龍骨合用潛鎮(zhèn)安神[3～4]。
　　 國家食品藥品監(jiān)管局發(fā)布施行《中藥注冊管理補

3、充規(guī)定》[5]，其規(guī)定項下第七條、第八條著重對中藥復方制劑的分類進行了細化，增加了“來源于古代經典名方的中藥復方制劑”和“主治為證候的中藥復方制劑”兩個類別，突出中醫(yī)藥特色、繼承傳統(tǒng)的思想。
　　 二、制備工藝的研究
　　 水提取工藝:采用正交試驗法優(yōu)選最佳提取工藝條件。結果水提取工藝條件為:加入10倍加水量，提取三次，每次提取兩小時。
　　 水提液濃縮工藝:以物料干燥情況為評價指標，考察了濃縮溫度、濃縮程度。結

4、果:水提液在80℃以下減壓濃縮，至相對密度1.18～1.23(60℃)之間即可。
　　 制劑成型工藝:通過對比試驗考察了不同稀釋劑及用量對制粒情況影響，并考察了顆粒的堆密度、臨界相對濕度、休止角情況影響。
　　 結果:清膏相對密度在1.18～1.23(60℃)之間，用清膏-輔料(1∶2)的比例加入糊精，將二者混勻，制粒，干燥，整粒，即得。
　　 三、質量標準研究
　　 TLC定性研究:采用TLC法對桂枝甘

5、草龍骨牡蠣湯顆粒中所含桂枝、炙甘草2味藥材進行了鑒別。試驗結果表明，供試品色譜中，在對照藥材或對照品色譜相應的位置上，均顯相同顏色的斑點，而陰性對照在相應位置無干擾。且經多次試驗，重現性良好。
　　 HPLC含量測定研究:采用HPLC法測定了桂枝甘草龍骨牡蠣湯顆粒中甘草苷含量，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-0.05％磷酸溶液（三乙胺調Ph至5.0）(18∶82)為流動相;檢測波長為277nm。理論板數按甘草苷峰計算應不

6、低于5000。并進行了方法學考察，結果表明該方法合理可行，重現性好，可用于桂枝甘草龍骨牡蠣湯顆粒的質量控制。
　　 本品每克含炙甘草以甘草苷計不得低于1.20mg。
　　 四、藥物穩(wěn)定性研究
　　 本品在加速試驗條件和室溫條件下觀察6個月，各項指標均符合規(guī)定，各批加速穩(wěn)定性和長期穩(wěn)定性炙甘草甘草苷含量RSD小于1.0％，質量檢測結果穩(wěn)定，長期穩(wěn)定性試驗9、12、18、24個月繼續(xù)觀察中。
　　 本品以藥用

7、復合膜為內包材，結果表明使用此包裝材料具有合理性;根據穩(wěn)定性研究結果，初步擬定本品有效期為24個月。
　　 五、毒理研究
　　 通過灌胃給予大鼠90天桂枝甘草龍骨牡蠣湯顆粒，研究本品所產生的長期毒性反應及其程度。應用SPF級SD大鼠120只，雌雄各半，隨機分為4組，每組30只進行試驗。分組設高（5.85g浸膏/kg），中(2.93g浸膏/kg)，低（1.46g浸膏/Kg）（分別相當于人臨床擬用量的60、30和15倍）三個

8、劑量組和空白對照組。大鼠灌胃給藥，每天給藥一次，連續(xù)90天。每周記錄動物體重及攝食量。給藥結束后，每組處死20只動物，進行臟器系數、血液學指標、血清生化學、血清電解質;每組剩余10只動物停藥30天作恢復期觀察及檢查。結果整個試驗期間大鼠整體狀況較好，體重正常增加，體重和攝食量各劑量組與對照組比較差異無顯著意義;臟器系數各劑量組與對照組比較差異無顯著意義;血液學指標、血清生化學、血清電解質各劑量組與對照組比較差異也無顯著意義;組織病理學檢