1、Y955150援縱學博士學位論文學校代碼：10246學弓：021023062人類多巴胺應答基因1，DRGJ功能的初步鑒定Functionalcharacterizationofhumandopamineresponsivegene1，DRG一1人類基因LASS2與其酵母同源基因LAGl的功能互補研究FunctionalcomplementationbetweenhumangeneLASS2anditsyeasthomologueLAGl

2、系(所)：遣佳堂煎蜜逝專業(yè)：遺佳堂姓名：一金蠢。攻讀學位：——擅圭導師：一：奎直田教援指導老師：昌紅副教援完成日期：2Q煎生!!旦!Q目■●●●●復旦大學博士學位論文摘要人類多巴胺應答基因1，DRGj在2002年被克隆到。在多巴胺刺激后，DRG1在大鼠星狀膠質(zhì)細胞中的表達發(fā)生上調(diào)。但是它的具體功能仍然未知。在本實驗中，我們發(fā)現(xiàn)DRG1是一個在后生動物中保守的基因，而且在同源基因的啟動子區(qū)域都含有一個NFKB的結(jié)合位點。組織表達譜的研究表

3、明，DRG1在人的肝，腎，胰腺和脾臟中的表達量較高。在酵母雙雜交的篩選中，DRG1可以與p75NTR介導的細胞死亡的執(zhí)行蛋白(NADE)相結(jié)合。該結(jié)合在體內(nèi)免疫共沉淀實驗和體外GSTpulldown實驗中都得到了驗證，而且DRG1和NADE共定位于293和PCI2細胞的胞漿中。系列缺失實驗表明兩者之間的結(jié)合是通過DRG1的N端1150氨基酸和NADE的C端59111氨基酸區(qū)域來介導的。在MIT細胞增殖測試中，穩(wěn)定表達的DRG—J可以促進

4、293細胞的增殖。而過量表達NADE可以抑制DRG1所促進的細胞生長。上述結(jié)果為通過多巴胺刺激上調(diào)DRGJ表達的機制提供了解釋，并且暗示DRG1參與了多巴胺受體誘導的細胞增殖，而這種增殖可以被NADE負調(diào)控。關鍵詞：DRG1，NADE，多巴胺，增殖AbstractHumandopamineresponsivegene一1(DRG—j)wasclonedin2002Itsexpressionlevelcanbeupregulatedint

5、heratastrocytestreatedwithdopamineHowever，itsfunctionsalenotclearuptonowInthisstudyDRG一1wasidentifiedtobeaconservedgeneinmetazoansandshareNF—KBbindingsiteswithitshomologuesintheirpromotersDRG—Jwashighlyexpressedinhumanli

6、verMdney’pancreasandspleenInyeasttwohybridscreen，DRG一1wasshowntobindwithp75m—associatedcelldeathexecutor(NADE)TheinteractionwasfurtherverifiedbothbyCO—immunoprecipitationassayinvitroandGSTpulldownassayinvivoFurthermore，D

7、RG一1andNADEwereCO—localizedinthecytoplasmof293andPCI2cellsTheregionsresponsibleforinteractionweresubsequentlymappedtothe1150aminoacidofDRG一1atN—terminaland59111aminoacidofNADEatCterminalNoticeablystableexpressionofDRG一1i