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![轉(zhuǎn)基因棉花突變體的鑒定和生理指標(biāo)分析.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/6defeaf1-0084-49b2-b5cb-919f369f827a/6defeaf1-0084-49b2-b5cb-919f369f827a1.gif)
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1、植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)是定向改良植物性狀、高頻誘發(fā)突變體產(chǎn)生的一條有效途徑,對(duì)于作物品種的改良和新品種選育具有重要意義。本研究以導(dǎo)入轉(zhuǎn)座活化結(jié)構(gòu)的不同陸地棉轉(zhuǎn)基因株系后代為材料,通過(guò)分子生物學(xué)手段對(duì)主要轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行了初步鑒定及其誘發(fā)突變的效應(yīng),并初步分析了相關(guān)突變材料在生理生化代謝方面的差異。其主要結(jié)果如下: 1.以篩選基因NPTII基因?yàn)樘禺愋砸飼r(shí),在4105為受體的轉(zhuǎn)基因株系中的擴(kuò)增陽(yáng)性率為26.1%,以1107為受體的轉(zhuǎn)基因株
2、系的擴(kuò)增陽(yáng)性率為27.2%。兩種受體材料的轉(zhuǎn)化效率比較接近;以Bar基因?yàn)橐飼r(shí),轉(zhuǎn)基因4105和1107的后代株系的擴(kuò)增陽(yáng)性率分別為28.1%和31.8%。通過(guò)分析可得出只含Bar基因的植株共122株,占被分析植株的比例為17.4%。說(shuō)明Ds發(fā)生了轉(zhuǎn)座,并與Ac因子產(chǎn)生了分離,有利于得到具有穩(wěn)定遺傳效應(yīng)的突變材料。 2.對(duì)T3代部分轉(zhuǎn)座活化的棉株進(jìn)行SouthernBlotting分析,初步證明外源基因已整合到棉花基因組中。
3、 3.轉(zhuǎn)基因棉花株系的主要生理指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果為:4105的L3株系在葉綠素含量和光合速率上與對(duì)照呈極顯著差異,1107為受體的L9株系在蕾期與對(duì)照相比存在顯著差異,在花鈴期和吐絮期與對(duì)照的差異達(dá)到極顯著水平,間接說(shuō)明轉(zhuǎn)座活化結(jié)構(gòu)中的35S四聯(lián)體增強(qiáng)子可影響插入位點(diǎn)附近的基因表達(dá)。此外,以4105為受體的轉(zhuǎn)基因株系的葉綠素含量和光合速率均高于以1107為受體的轉(zhuǎn)基因株系,說(shuō)明轉(zhuǎn)基因的受體不同產(chǎn)生的突變效應(yīng)也存在差異??傮w來(lái)看,410
4、5轉(zhuǎn)基因棉花株系中產(chǎn)生的晚熟類型的變異較多;而1107轉(zhuǎn)基因株系中出現(xiàn)的早熟類型的變異較多。 4.通過(guò)對(duì)不同轉(zhuǎn)基因株系葉片可溶性蛋白質(zhì)進(jìn)行SDS-PAGE,得到結(jié)果如下:轉(zhuǎn)基因棉花突變體在某些蛋白亞基的表達(dá)量上高于對(duì)照,尤其是分子量大約為50kD的亞基。此外,在相同的環(huán)境條件下,轉(zhuǎn)基因棉花突變系的SDS-PAGE圖譜中還出現(xiàn)了一條大約42kD的蛋白質(zhì)條帶,而在對(duì)照中則不存在此條帶,說(shuō)明導(dǎo)入轉(zhuǎn)座活化結(jié)構(gòu)的棉花后代株系中可能存在由增
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