嗜鹽α-淀粉酶的鑒定及其與嗜鹽相關的氨基酸殘基研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩88頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、嗜鹽α-淀粉酶具有獨特的鹽適應機制,使其在各種高鹽等極端環(huán)境中,依然能夠高效、穩(wěn)定地行使其生物催化能力,在精密化工、水產、食品及其診斷試劑等眾多行業(yè)中,都具有廣闊的應用前景。目前,雖然嗜鹽酶的相關研究已經成為一個熱點,但是目前嗜鹽酶的鹽適應性機理還處于假說階段,還不能完全解釋嗜鹽酶的嗜鹽分子機理,因此繼續(xù)嗜鹽酶的相關研究,對探索其嗜鹽的本質就顯得尤為重要。
  從非嗜鹽的大腸桿菌JM109中克隆到一個嗜鹽α-淀粉酶基因并重組表達。

2、通過蛋白比對、同源建模,確定Na+結合位點上的氨基酸殘基,并對相應位點進行定點突變,以此來初步探索嗜鹽淀粉酶的嗜鹽特性和機理。突變酶的酶學性質研究結果表明,相對于野生酶而言,突變酶K6-N204D和K6-P368G更加嗜鹽,其最適NaCl濃度由野生酶的2 mol/L增加到3 mol/L,具有更好的嗜鹽性,最適pH均為7.0,最適溫度分別為55℃、50℃,比活力分別為18200 U/mg和4831U/mg。此外突變酶K6-N204D和K6

3、-P368G在無NaCl情況下,也顯示出了酶活,雖然其比活偏低僅為30 U/mg和130 U/mg,但是相對于野生酶K6而言,已是很大的改變。而K6-R208D-N209H-A211E三點連續(xù)突變后,其蛋白酶在有無NaCl情況下,均不顯示出酶活。
  與此同時,本文還從同樣屬于非嗜鹽菌的根癌農桿菌EHA1252中獲得一個嗜鹽α-淀粉酶基因,經表達純化,研究其相關的酶學性質,測定結果顯示,其最適NaCl濃度達到近飽和的5.5 mol

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論