不同類型內(nèi)蒙古白絨山羊瘤胃甲烷菌數(shù)量及多樣性比較研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、分別采集阿爾巴斯型、二郎山型、阿拉善型白絨山羊瘤胃液,通過發(fā)酵參數(shù)測定、限制性片段長度多態(tài)性分析(RFLP)、實時熒光定量分析(qPCR),對三種類型內(nèi)蒙古白絨山羊瘤胃發(fā)酵特性、產(chǎn)甲烷菌菌群多樣性和數(shù)量進行比較研究。
  試驗一,不同類型內(nèi)蒙古白絨山羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的比較研究。
  試驗結果表明,阿拉善型瘤胃液pH值顯著低于阿爾巴斯型(P=0.017),其它各組之間無顯著差異。阿拉善型氨態(tài)氮濃度極顯著高于阿爾巴斯型和二郎山型(

2、P<0.001)。乙酸濃度阿拉善型極顯著高于阿爾巴斯型(P=0.007)。丙酸濃度阿拉善型顯著高于阿爾巴斯型(P=0.025)。丁酸濃度阿拉善型顯著高于阿爾巴斯型和二郎山型(P=0.023)。乙酸/丙酸阿爾巴斯型極顯著低于二郎山型和阿拉善型(P=0.004)??倱]發(fā)性脂肪酸濃度阿拉善型顯著高于阿爾巴斯型(P=0.011)。
  試驗二,不同類型內(nèi)蒙古白絨山羊瘤胃甲烷菌多樣性的比較研究。
  提取三種白絨山羊瘤胃液微生物基因組

3、,選取特異性引物Met86f/Met1304r擴增瘤胃甲烷菌16srDNA基因片段,并建立基因文庫,用限制性內(nèi)切酶Hind III進行RFLP分析,建立系統(tǒng)進化樹。結果表明,不同類型內(nèi)蒙古白絨山羊瘤胃中甲烷菌菌群不同,即阿爾巴斯型:3種產(chǎn)甲烷菌,優(yōu)勢甲烷菌為DQ402028,屬于未培養(yǎng)的產(chǎn)甲烷菌。阿拉善型:4種甲烷菌,優(yōu)勢菌為 DQ135988,屬于甲烷短桿菌。二郎山型:3種甲烷菌,優(yōu)勢菌為JF807221,屬于未培養(yǎng)的產(chǎn)甲烷菌。

4、>  試驗三,不同類型內(nèi)蒙古白絨山羊瘤胃甲烷菌數(shù)量的比較研究。
  選取甲烷菌特異性引物 Met630F/Met803R進行 PCR擴增,回收 PCR產(chǎn)物中的DNA用以克隆,并提取標準質(zhì)粒,構建標準曲線,根據(jù)標準曲線對瘤胃中甲烷菌進行絕對定量。結果表明,阿爾巴斯型、二郎山型和阿拉善型內(nèi)蒙古白絨山羊瘤胃液中產(chǎn)甲烷菌的拷貝數(shù)依次為4.5×108、6.68b×108、3.89×109copy/ml,且阿爾巴斯型極顯著高于阿拉善型(P<0

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