1、類固醇激素難于降解、可在環(huán)境中持久存在，與生物體內類固醇激素受體結合，影響體內激素的合成、運輸、釋放和代謝；擾亂內分泌系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)及神經系統(tǒng)的功能；造成機體免疫和生殖等功能的障礙，且在極低的濃度下，就可對生物體造成危害。探索環(huán)境中類固醇激素的降解問題，已成為現今研究熱點之一，其中微生物降解是去除環(huán)境中類固醇激素的最有效的方法。而海洋環(huán)境中類固醇激素降解菌研究報道很少，本文從海洋環(huán)境中分離、篩選出類固醇降解菌，研究菌株對類固醇激素的降解

2、能力、降解的中間代謝產物及與降解相關的功能基因，初步探討菌株降解類固醇激素的分子機制。獲得如下主要結果：
　　從南海采集環(huán)境樣品，利用BOX-PCR法，篩選類固醇激素降解菌株31株，其中變形菌門γ亞群占77％，厚壁菌門占13%，放線菌門占10%；利用靜息態(tài)法測定降解率，分離獲得的大多數菌株對于相應的底物都具有一定的降解能力，其中菌株M39對E2（雌二醇）降解率為60.33%，菌株M30對T（睪酮）降解率為64.04%。
　　

3、菌株M39不具有運動性，可在37℃、6.5%鹽濃度生長；明膠液化、產H2S、甲基紅實驗為陰性，淀粉水解、V-P實驗為陽性；可利用麥芽糖、甘露糖、甘露醇發(fā)生同化反應，不可利用阿拉伯糖、N-乙酰葡萄糖胺、醋酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽。菌株M30可在37℃、6.5%鹽濃度生長，明膠液化、產H2S為陽性，可利用阿拉伯糖、麥芽糖、甘露糖、甘露醇、N-乙酰葡萄糖胺發(fā)生同化反應。進一步結合16S rRNA基因序列分析結果，推測菌株M39、M30可能為新種

4、，分別命名為Microbacterium sp. M39、Brevibacterium sp. M30。
　　分析菌株M39、M30對類固醇的降解能力，結果表明菌株M39可降解E2、T，不可降解E1（雌酮）、E3（雌三醇）、EE2（乙炔雌二醇），但在有E2的存在下，可降解E1；菌株M30具有T的降解能力，但相對于菌株M39，其降解能力較弱。
　　采用GC-MS，在菌株M39降解E2的中間代謝產物中，檢測到E1、內酯（5-羥基

5、-15甲基-13-雜氧四環(huán)[8.7.0.0<2,7>.0.<11,15>]十七烷基-2(7),2,5-三烯-14酯）。采用2-D電泳、結合MALDI-TOF-MS分析，在菌株M39降解E2過程中，檢測到降解途徑中的關鍵性酶short-chain dehydrogenase，結合相關文獻報道，推測菌株M39降解E2的可能代謝途徑為：先通過類固醇脫氫酶將E2降解為E1，再在加氧酶的作用下開D環(huán)，生成內酯，然后內酯開環(huán)，進一步降解，最后通過脂

6、肪酸β氧化和TCA循環(huán)降解為二氧化碳和水。
　　檢測菌株 M39降解 T的中間代謝產物，發(fā)現有 AD（Androst-4-ene-3,17-dione）、ADD（1,4-androstadiene-3,17-dione）、6β-hydroxytestosterone；結合相關文獻報道，推測菌株M39降解T的途徑可能為先降解為AD，AD再降解為ADD，或T經過羥基化生成6β-hydroxytestosterone，進一步降解，最后降