1、氨基葡萄糖（GlcN）是人體關節(jié)軟骨基質中合成蛋白聚糖所必需的重要成分。它對于人體及動物體的關節(jié)健康和身體的免疫調節(jié)具有重要的作用。目前商品化的GlcN全部是來自蝦、蟹等甲殼原料的高溫水解,生產過程能耗大，污染嚴重，因此，有必要從根本上改變GlcN的生產方法。利用微生物發(fā)酵法直接合成GlcN是理想的策略，在此前報道中已有利用微生物發(fā)酵直接合成 GlcN的先例，但其無法解決在發(fā)酵過程種實時檢測GlcN變化的問題。glmS核糖開關是至今發(fā)現

2、的唯一能夠調控糖代謝的核糖開關，只存在于革蘭氏陽性菌中，位于編碼氨基葡萄糖合酶的mRNA的5'UTR內，它需要小分子物質GlcN-6P才能激活，這在已經發(fā)現的核酶中是非常少見的，目前對glmS核糖開關的相關研究較少。
　　本文的主要內容為：利用 glmS核糖開關與增強型綠色熒光蛋白構建生物傳感器，并在枯草芽孢桿菌中驗證其功能。本文首次將釀酒酵母的氨基葡萄糖合酶基因（gfa1）和枯草芽孢桿菌的氨基葡萄糖合酶基因（glms）分別與氨基

3、葡萄糖乙?；富颍╣na1）連接，再與glms生物傳感器相連接，（1）gfa1-gna1-生物傳感器利用枯草芽孢桿菌表達載體 PHT01質粒，轉化到安全菌株枯草芽孢桿菌WB800N中；(2) glms-gna1-生物傳感器分別通過表達載體PHT01質粒，轉化到安全菌株枯草芽孢桿菌WB800N中；(3) glms-gna1-生物傳感器直接整合到枯草芽孢桿菌WB800N中。通過比對熒光強度和GlcN含量，確定熒光強度和GlcN含量的關系。

4、并通過熒光強度和GlcN的對比，篩選出高產GlcN的菌株。
　　研究結果表明，實現gfa1與gna1組合和glms與gna1組合兩種組合通過穿梭質粒和整合基因組兩種不同方式在枯草芽孢桿菌表達體系里的表達，以上基因的表達，成功提高胞內GlcN及GlcNAc的含量。并通過分析GlcN含量與熒光表達的關系，最終得出整合型工程菌WB800N-glms-gna1-Ribo-egfp最終發(fā)酵結果最好，最終產量達到20.4g/L，是原始菌Glc