1、綠色熒光蛋白(greenfluorescentprotein，GFP)是一種能夠自身催化形成生色團并在藍光或紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光的蛋白。綠色熒光蛋白具有熒光穩(wěn)定，檢測方便，對活細胞無傷害等優(yōu)點，已被作為一種標記基因應用到生物學研究的各個領域。系統(tǒng)性表達綠色熒光蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠，可實現(xiàn)綠色熒光蛋白在小鼠全身各個組織器官中表達，尤其在胰腺、心臟、小腸、外周血細胞和腦組織等器官組織中表達量較高。將該小鼠與BALB/c裸小鼠雜交，通過多代篩

2、選建立穩(wěn)定的系統(tǒng)性表達綠色熒光的轉(zhuǎn)基因裸鼠。該小鼠具有裸鼠的特性并系統(tǒng)性表達綠色熒光蛋白，可以利用光學成像技術跟蹤靶細胞，是干細胞，腫瘤細胞藥物臨床前研究的工具小鼠。針對此種綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因裸鼠，本研究主要從以下兩個方面展開：
　　 1．綠色熒光轉(zhuǎn)基因裸鼠接種紅色熒光蛋白標記A549細胞的實驗研究
　　 利用系統(tǒng)性表達綠色熒光蛋白的C57BL/6J小鼠與BALB/c裸小鼠多代雜交和互交，建立穩(wěn)定表達綠色熒光蛋白的轉(zhuǎn)基因

3、裸鼠。大體解剖觀察胸腺生長情況，整體和器官熒光成像驗證綠色熒光蛋白的表達情況。以2×106/只的劑量對6周齡的綠色熒光轉(zhuǎn)基因裸鼠皮下腋下接種表達紅色熒光蛋白的人類A549肺癌細胞(RFP-A549)，通過觀測腫瘤生長來驗證模型的免疫缺陷性。同時，利用紅色熒光標記的腫瘤和綠色宿主鼠，對雙色熒光的整體成像效果進行觀測。并利用雙色熒光，在組織細胞水平對腫瘤部位細胞的來源進行區(qū)分，探索腫瘤血管的來源，并觀測腫瘤對肺部的轉(zhuǎn)移情況。
　　

4、2．臍帶間充質(zhì)干細胞在綠色熒光裸鼠體內(nèi)的定位實驗
　　 將紅色熒光蛋白標記的人類臍帶間充質(zhì)干細胞(RFP-hUC-MSCs)和熒光素酶標記的人類臍帶間充質(zhì)干細胞(LUC-hUC-MSCs)尾靜脈注射到綠色熒光裸鼠體內(nèi)，利用活體成像技術跟蹤uMSCs綠色熒光裸鼠體內(nèi)的分布和消退。在活體成像中，通過對同一組實驗對象在不同時間點進行記錄，跟蹤臍帶間充質(zhì)干細胞的移動及消退，可以消除個體差異，所得的數(shù)據(jù)更加真實可信。在實驗中通過四氯化碳誘