具有檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)氧化-還原物種功能的熒光探針設(shè)計(jì)及應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、在復(fù)雜的生命系統(tǒng)中存在許多物質(zhì)的共同參與而使其維持內(nèi)環(huán)境的代謝平衡狀態(tài)。這種平衡狀態(tài)不是指靜止不動(dòng)的,而是機(jī)體內(nèi)在各種物理、化學(xué)反應(yīng)中達(dá)到的一種動(dòng)態(tài)平衡。在眾多的動(dòng)態(tài)平衡中,氧化/還原態(tài)的動(dòng)態(tài)平衡在維持細(xì)胞正常代謝過(guò)程中扮演著至關(guān)重要的角色,所以建立快速準(zhǔn)確的能檢測(cè)那些能夠有效維持細(xì)胞內(nèi)氧化/還原動(dòng)態(tài)平衡的硫醇,以及活性氧的含量的分析方法是十分重要的,同時(shí)對(duì)相關(guān)生理及病理的研究也會(huì)有重大意義。
  在醫(yī)學(xué)成像顯著發(fā)展的今天,熒光分

2、子探針受到了人們廣泛的青睞。對(duì)目標(biāo)物的高靈敏度、高選擇性檢測(cè)一直是熒光分子探針的明顯優(yōu)勢(shì),不僅如此,由于其可以實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)空間成像,并且具有對(duì)活細(xì)胞或者組織光損傷小及背景干擾小等特點(diǎn),為可視化研究細(xì)胞物種的代謝過(guò)程以及研究病理過(guò)程的分子機(jī)制提供了一條有效途徑。
  本論文中,我們以熒光光譜為主要檢測(cè)手段,以二氰基異佛爾酮為設(shè)計(jì)平臺(tái),綜合運(yùn)用分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移機(jī)制為探針熒光信號(hào)變化的檢測(cè)原理,設(shè)計(jì)合成了五種具有較大斯托克斯位移的熒光分子探針

3、,分別用于硫醇類化合物、次氯酸以及重金屬的檢測(cè)。這五種熒光分子探針不僅展現(xiàn)出了令人滿意的熒光光譜檢測(cè)性能,而且在細(xì)胞內(nèi)對(duì)相應(yīng)物種也具有明顯的熒光成像檢測(cè)效果。具體研究?jī)?nèi)容如下:
  (1)在第2章中,分別以有機(jī)硼酸的C-B鍵和吩噻嗪中的S原子為識(shí)別位點(diǎn),設(shè)計(jì)合成了兩種對(duì)次氯酸根具有選擇性性能的熒光探針X1和X2。探針X1是具有近紅外熒光發(fā)光性能的分子探針。該探針表現(xiàn)出了較大的斯托克斯位移(145 nm),較廣的pH使用范圍(4.0

4、-11.0)。利用吩噻嗪中的S原子作為對(duì)HClO/ClO-的響應(yīng),探針X2可以實(shí)現(xiàn)對(duì)HClO/ClO-的快速檢測(cè),檢測(cè)限達(dá)到10-8 M量級(jí)。探針X2不僅可以對(duì)細(xì)胞中外源性HClO/ClO-進(jìn)行熒光成像檢測(cè),而且可以對(duì)細(xì)胞中內(nèi)源性的HClO/ClO-進(jìn)行有效的熒光成像檢測(cè),為該探針的實(shí)際應(yīng)用奠定了一定的基礎(chǔ)。
 ?。?)在第3章中,分別以2,4-二硝基苯磺酰氯和NBD-Cl為原料,設(shè)計(jì)合成了兩種對(duì)硫醇類物種具有識(shí)別性能的熒光分子探

5、針 T1和 T2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:在PBS/乙醇溶液中,熒光分子探針T1對(duì)GSH、Cys、Hcy和NAC具有良好的選擇性,并且檢測(cè)限均可達(dá)到10-8 M量級(jí),斯托克斯位移達(dá)到157 nm。與探針T1相比,熒光分子探針T2在HEPES乙醇體系中,不僅可以檢測(cè)GSH、Cys、Hcy和NAC,而且對(duì)Hcy具有更高的選擇性,實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞內(nèi)Hcy的熒光成像檢測(cè)。
 ?。?)在第4章中,利用Hg2+離子的親S特性和Hg2+離子的配位反應(yīng)特性進(jìn)行了

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