1、目的:宮頸癌(Cervical Cancer)是最常見的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率居女性惡性腫瘤的第二位，僅次于乳腺癌，其病理類型常見的有鱗癌、腺癌、腺鱗癌，其發(fā)病原因主要與以下因素有關:1.高危型HPV感染;2.性行為及分娩次數(shù);3.沙眼衣原體、單純皰疹病毒Ⅱ型、滴蟲等病原體的感染起著協(xié)同作用;4.吸煙以及營養(yǎng)不良、衛(wèi)生條件差等。發(fā)病早期的宮頸癌常無明顯的癥狀和體征，宮頸光滑或難與宮頸柱狀上皮異位相鑒別。頸管型患者因宮頸外觀正常易漏診或

2、誤診。其轉移途徑主要為直接蔓延及淋巴轉移，血行轉移較少見。在細胞代謝、DNA合成和修復以及癌細胞快速增殖分裂過程中葉酸發(fā)揮著重要作用，快速分裂癌細胞的DNA合成對于葉酸有很高的需求，所以近年來轉運葉酸進入細胞內的葉酸受體α成為人們的研究熱點。葉酸受體是一種膜結合蛋白，它在結合運輸生理水平的葉酸到細胞內的過程中發(fā)揮著重要的作用，其在正常組織中低表達，在腫瘤細胞膜表面高度表達，葉酸受體(FR)分為FR-α、FR-β、FR-γ，其中FR-α高

3、表達于黏液腺癌中，包括卵巢腺癌、子宮腺癌、宮頸腺癌、睪丸絨毛膜癌和某些腦腫瘤中，并且少量地表達于腎、結腸及心臟等癌癥中。Ki-67是存在于增殖細胞核的與細胞增殖密切相關的核蛋白，作為評價細胞增殖的標記物，現(xiàn)已廣泛地應用于腫瘤的研究和探討中。本實驗用免疫組織化學法（immunohistochemistry）檢測宮頸癌組織中FR-α蛋白及Ki-67的表達，探討二者的關系及其臨床意義。
　　方法:采用免疫組織化學PV法檢測正常宮頸組織、

4、宮頸上皮內瘤變組織以及宮頸癌組織中FR-α蛋白表達及Ki-67的表達。分實驗組:宮頸癌33例（其中宮頸癌Ⅰ期11例，宮頸癌Ⅱ期12例，宮頸癌Ⅲ期10例）。對照組:正常宮頸組織30例，宮頸上皮內瘤變組織42例，陽性表達判斷:細胞胞漿內出現(xiàn)棕黃色顆粒為準，參考Soslow RA和劉祖國等[1][2]提到的方法，采用免疫組化評分法來判定結果，先按染色強度評分:未見染色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;再按陽性細胞所占百分比評分

5、:隨機選取高倍鏡(×200)下觀察5個視野，每個視野計數(shù)100個細胞，進行陽性細胞數(shù)分級，0-1％=0，1-10％=1，10-50％=2，50-80％=3，80-100％=4)。兩項評分乘積所得總分(IHS)進行結果判定:IHS0分為(-)，IHS1～4分為(+)，IHS5～8分為(++)，IHS9～12分為(+++)。Ki-67結果判斷:細胞胞漿內出現(xiàn)棕黃色顆粒為準，參考Soslow RA和劉祖國等[1][2]提到的方法，采用免疫組化

6、評分法來判定結果，先按染色強度評分:未見染色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;再按陽性細胞所占百分比評分:隨機選取高倍鏡(×200)下觀察5個視野，每個視野計數(shù)100個細胞，行陽性細胞數(shù)分級，0-1％=0，1-10％=1，10-50％=2，50-80％=3，80-100％=4)。兩項評分乘積所得總分(IHS)進行結果判定:IHS0分為（-），IHS1～4分為(+)，IHS5～8分為(++)，IHS9～12分為（+++）。

7、所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理。計數(shù)資料采用x2(PearsonChi-Square Test)或Fish確切概率法;兩組變量間的相關分析采用Spearman等級相關分析。所有檢驗均為雙側，P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。
　　結果:
　　1.正常宮頸組織、宮頸上皮內瘤變組織、宮頸癌組織中FR-α蛋白表達正常宮頸組織、宮頸上皮內瘤變組織、宮頸癌組織中FR-α蛋白表達于細胞漿中，呈棕黃色顆粒。在本實驗中，正常宮頸組織FR

8、-α蛋白表達陽性率為6.7％，宮頸上皮內瘤變組織FR-α蛋白表達陽性率為76.2％，宮頸癌組織FR-α蛋白表達陽性率為81.7％，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見table1。宮頸上皮內瘤變組織與正常組織中FR-α的表達陽性率相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見table1。宮頸癌組織與宮頸上皮內瘤變組織中FR-α蛋白表達陽性率相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見table1。
　　2.不同病理類型中FR-α蛋白表

9、達CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中FRα蛋白表達有差異，三者相比無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見table2。宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期、宮頸癌Ⅲ期蛋白表達有差異，三者差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見Table3。
　　3.FR-α蛋白表達與宮頸癌危險因素的相關性在宮頸癌組織及宮頸上皮內瘤變組織中，F(xiàn)R-α蛋白表達與年齡因素無關，年齡＞40與年齡≤40兩組差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見Table4。在兩組中，F(xiàn)R-α蛋白表達與

10、HPV感染均有關，HPV感染陽性與HPV感染陰性兩組差別有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見Table4。
　　4.正常宮頸組織、宮頸上皮內瘤變組織、宮頸癌組織中Ki-67表達正常宮頸組織、宮頸上皮內瘤變組織、宮頸癌組織中Ki-67表達于細胞核中，呈棕黃色顆粒。在正常宮頸組織中未見Ki-67表達（見Fig.4），宮頸上皮內瘤變組織及宮頸癌組織中Ki-67表達升高（見Fig.5，F(xiàn)ig.6），正常宮頸組織中Ki-67陽性率0％，宮頸上皮

11、內瘤變組織中Ki-67陽性率71.4％，宮頸癌病變組織中Ki-67陽性率84.8％，三者差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見table5，正常宮頸組織與宮頸上皮內瘤變組織中Ki-67蛋白表達陽性率相比，兩者差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，宮頸上皮內瘤變組織與宮頸癌病變組織中Ki-67蛋白表達陽性率相比，兩者差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見Table5。
　　5.不同病理類型中Ki-67表達CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ蛋白表達

12、有差異，三者相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見table6。宮頸癌Ⅰ期、宮頸癌Ⅱ期、宮頸癌Ⅲ期Ki-67蛋白表達有差異，三者差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見Table7。
　　6.Ki-67蛋白表達與宮頸癌危險因素的相關性在宮頸癌及宮頸上皮內瘤變組織中，Ki-67蛋白表達與年齡因素無關，年齡＞40與年齡≤40兩組差別無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見Table8。在兩組中Ki-67蛋白表達與HPV感染無關，HPV感染陽性與

13、HPV感染陰性兩組差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見Table8。
　　7.宮頸上皮內瘤變組織及宮頸癌組織中FR-α蛋白表達與Ki-67的關系:
　　宮頸癌組織中二者呈正相關，相關系數(shù)r=0.532，p=0.000，有相關性，有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。宮頸上皮內瘤變組織中，F(xiàn)R-α蛋白表達與Ki-67蛋白表達呈正相關，相關系數(shù)r=0.504，p=0.003，有相關性，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結論: