茵芩清肝湯干預(yù)對(duì)非酒精性脂肪肝炎大鼠細(xì)胞因子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、[研究背景]:非酒精性脂肪肝炎(Non-alcoholic Steatohepatitis,NASH)是非酒精性脂肪性肝?。∟on-alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)病理進(jìn)程中至關(guān)重要的一個(gè)階段,直接影響著初始單純性脂肪肝的發(fā)展趨勢(shì)以及后期疾病的轉(zhuǎn)歸。但是,關(guān)于NSAH的病理機(jī)制及治療方案目前尚未完全明確。
  [研究目的]:本研究通過(guò)高脂飲食誘導(dǎo)NASH大鼠的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,觀察高脂飲食喂養(yǎng)和

2、應(yīng)用茵芩清肝湯后大鼠生活習(xí)性和體貌特征的改變,在實(shí)驗(yàn)2周和4周分別處死實(shí)驗(yàn)大鼠,收集肝臟組織和血液標(biāo)本,肉眼觀察肝臟組織的改變,檢測(cè)血脂、肝功能和細(xì)胞因子,具體數(shù)據(jù)做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,評(píng)價(jià)茵芩清肝湯對(duì)于NASH大鼠的療效。基于實(shí)驗(yàn)結(jié)果,以引起細(xì)胞因子白介素-6(Interleukin-6, IL-6)、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)釋放的信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制為切入點(diǎn),探討茵芩清肝湯治療NASH的分子機(jī)制

3、。
  [研究方法]:將40只購(gòu)自湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心全部體重在200g±10g范圍內(nèi)的健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組,每組10只,各組分別命名為空白對(duì)照組(K組)、模型組(M組)、中藥低劑量組(D組)和中藥高劑量組(G組),并給每只實(shí)驗(yàn)用大鼠做標(biāo)記以便區(qū)分??瞻讓?duì)照組大鼠全程均飼喂普通飼料,另外3組大鼠在適應(yīng)性喂養(yǎng)后,改為按標(biāo)準(zhǔn)劑量配比的高脂飲食喂養(yǎng)。1周后開(kāi)始灌胃治療,具體操作為:空白對(duì)照組和模型組大鼠給予生理鹽水灌胃,中藥高低劑

4、量組(統(tǒng)稱為治療組)則給予不同濃度茵芩清肝湯灌胃,隔天一次。分別于實(shí)驗(yàn)第2周和第4周的周末,在每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中隨機(jī)選擇5只大鼠逐一處死,取實(shí)驗(yàn)大鼠的血清標(biāo)本和肝組織標(biāo)本分開(kāi)保留,存放于-80℃冰箱,待測(cè)。檢測(cè)大鼠血清甘油三酯(triglyceride,TG)和總膽固醇水平(total cholesterol,TC),肝組織天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine

5、aminotransferase,ALT),IL-6和TNF-α水平,反饋的數(shù)據(jù)具體做相關(guān)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
  [研究結(jié)果]:①一般情況:模型組和中藥高、低劑量組的大鼠體重增加,皮毛粗糙,體重明顯大于空白對(duì)照組,精神萎靡,日?;顒?dòng)減少。模型組大鼠整個(gè)肝臟的色澤呈現(xiàn)土黃色及黃色花斑,切開(kāi)后見(jiàn)切面油膩,部分有黃白色脂質(zhì)沉積,肝臟質(zhì)地較脆,有脂肪變性的典型表現(xiàn)。
  ②高脂飲食喂養(yǎng)的大鼠血清 TC、TG值較空白對(duì)照組明顯升高(P<0

6、.01),經(jīng)茵芩清肝湯治療的大鼠較給予生理鹽水灌胃治療的模型組大鼠血清TC、TG值降低(P<0.05),隨治療時(shí)間的延長(zhǎng),中藥治療組大鼠的血清TC、TG值逐漸下降,接近于空白對(duì)照組,且中藥高劑量組效果優(yōu)于中藥低劑量組(P<0.05)。
 ?、鄹咧嬍澄桂B(yǎng)的大鼠肝組織AST、ALT活性值較空白對(duì)照組明顯升高(P<0.01),經(jīng)茵芩清肝湯治療的大鼠較給予生理鹽水灌胃的模型組大鼠血清AST、ALT值降低(P<0.05),中藥組高劑量效果

7、優(yōu)于中藥低劑量組(P<0.01)。
  ④高脂飲食喂養(yǎng)的3組大鼠的 TNF-α、IL-6值較空白對(duì)照組明顯升高(P<0.01);經(jīng)茵芩清肝湯治療的2組大鼠較給予生理鹽水灌胃的模型組大鼠血清TNF-α、IL-6值降低(P<0.01),隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng),中藥治療大鼠血清TNF-α、IL-6值降低且中藥高劑量組效果更明顯。
  [研究結(jié)論]:①飼喂高脂飲食大鼠較空白對(duì)照組大鼠肝臟組織肉眼形態(tài),血脂、肝功能等發(fā)生了異常改變,提示高

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