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![宮頸癌中miRNAs差異性表達的實驗研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/2632bc4e-7109-4213-bf8f-c4a8668834e6/2632bc4e-7109-4213-bf8f-c4a8668834e61.gif)
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文檔簡介
1、目的:
探究宮頸癌患者血清及組織標本中miRNAs的表達情況,尋找差異性表達的miRNA,以期為宮頸癌的早期診斷和靶向治療提供新的生物標記物。
方法:
(1)收集臨床宮頸癌首診患者和健康體檢者的血清;
(2)收集臨床宮頸癌患者術(shù)后腫瘤標本和行宮頸錐切術(shù)宮頸炎患者的宮頸組織;
(3)PCR對患者及對照組的高危型HPV感染情況進行分型檢測;
(4)用miRNA array技術(shù)篩查宮
2、頸癌患者血清中miRNA的表達譜;
(5)實時定量PCR檢測各樣本中miRNA的表達水平;
(6)Targetscan預(yù)測差異性表達miRNA的靶基因;
(7)實時定量PCR、免疫組化技術(shù)檢測宮頸癌組織中靶基因的表達水平;
(8)統(tǒng)計學分析血清樣本及組織標本中miRNA和靶基因的表達差異。
結(jié)果:
(1)miRNA array顯示在宮頸癌患者血清中miR-34a、miR-27a
3、、miR-221、miR-203、miR-205、miR-15b、miR-25、miR-222、miR-21、miR-200b及 miR-16較正常對照組有差異;
(2)qRT-PCR顯示在宮頸癌患者血清中miR-34a呈低表達(P<0.05),miR-21、miR-200b及miR-221呈高表達(P<0.05);
(3)Targetscan預(yù)測miR-21、miR-200b和miR-221三個高表達的miRNAs
4、的共同靶基因有AGO2、FOXN2、FOXP1、PKIA、PPP6C、CNOT6、TRPM3和BCL11B等8個,低表達的miR-34a的有PD-L1、HMGB1、c-Met和Bcl-2等;
(4)在宮頸癌組織中 miR-21(P<0.05)、miR-200b(P<0.01)及miR-221(P<0.05)呈高表達,miR-34a(P<0.05)呈低表達。miR-21、miR-200b和miR-221三個高表達的miRNAs的
5、共同靶基因中有AGO2表達升高(P<0.01)、FOXP1和CNOT6表達降低(P<0.05),而miR-34a的靶基因PD-L1、HMGB1和c-Met的表達均升高(P<0.05)。
結(jié)論:
(1)U6在宮頸癌血清及組織中表達穩(wěn)定,可以作為宮頸癌相關(guān)miRNA研究中的內(nèi)參基因;
(2)miR-21、miR-34a、miR-200b和miR-221在宮頸癌血清及組織中均為差異性表達,且在組織和血清中的表達一
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