1、近年來(lái),微流控芯片具有多功能集成、處理速度快、消耗試劑少和可高通量同時(shí)處理多個(gè)樣品等優(yōu)點(diǎn),因而在化學(xué)、生物、臨床、環(huán)境及公共安全的廣泛領(lǐng)域得到應(yīng)用。同時(shí),生物分子微陣列技術(shù)也因?yàn)榭梢愿咄亢透邊?shù)地分析生物、藥物或臨床樣品而獲得大量應(yīng)用。兩者的結(jié)合,即蛋白質(zhì)陣列微流控芯片,可同時(shí)具有兩種技術(shù)的優(yōu)勢(shì),既可處理復(fù)雜的生物或醫(yī)學(xué)體系,又可高選擇高參數(shù)地分析生物醫(yī)學(xué)樣品,成為新的生物或醫(yī)學(xué)的高效研究工具平臺(tái)。
　　 本論文圍繞具蛋白質(zhì)陣

2、列的不可逆封合微流控芯片制作方法進(jìn)行研究,重點(diǎn)探索高精度蛋白質(zhì)陣列制作方法、制作過(guò)程蛋白質(zhì)活性保持等關(guān)鍵技術(shù),具體研究?jī)?nèi)容如下:
　　 1.探索和優(yōu)化了玻璃表面修飾和聚乙烯醇(PVA)犧牲層制作的工藝,同時(shí)考察了微流控制作過(guò)程中的溫度、臭氧活化工藝對(duì)所選用蛋白質(zhì)牛血清白蛋白(BSA)和明膠蛋白(Gelatin)結(jié)構(gòu)和活性的影響,為蛋白質(zhì)陣列封合芯片的后續(xù)制作建立基礎(chǔ)。
　　 2.建立了微印章法,考察并優(yōu)化了濕潤(rùn)度、聚二甲

3、基硅氧烷(PDMS)微結(jié)構(gòu)等工藝參數(shù),在PDMS/玻璃微流控芯片中成功制作蛋白質(zhì)陣列,使用PVA膜保護(hù)蛋白陣列活性。
　　 3.建立了刻蝕法,考察并優(yōu)化了刻蝕功率、時(shí)間等工藝參數(shù),成功制作了蛋白質(zhì)陣列微流控芯片,并用于Hela細(xì)胞捕獲。
　　 4.提出并建立了金包被法,考察并優(yōu)化了金屬沉積、剝離等工藝參數(shù),成功制作了蛋白質(zhì)陣列微流控芯片,蛋白陣列圖案精度高,邊緣清晰。免疫反應(yīng)測(cè)試和細(xì)胞貼附試驗(yàn)表明,蛋白陣列在不可逆封合后

4、還具有很高的活性,捕獲的細(xì)胞陣列圖案清晰,可用于單細(xì)胞陣列的進(jìn)一步研究。
　　 5.組建了細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室并建立了Hela細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),考察了Hela細(xì)胞在BSA和Gelatin蛋白質(zhì)表面的吸附行為,及培養(yǎng)時(shí)間對(duì)細(xì)胞在蛋白表面貼附的影響。同時(shí)考察了Hela細(xì)胞在PDMS表面的吸附生長(zhǎng)行為,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞在PDMS表面可良好生長(zhǎng)。
　　 6.建立了微流控芯片中Hela細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),探索了剪切力、氣泡等對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。