1、第一部分:不同時期Ⅰ型糖尿病對小鼠心肌缺血再灌注損傷的影響及其作用機制研究
　　研究背景:缺血再灌注損傷的存在嚴重影響了冠脈再灌注治療的獲益。臨床冠心病患者常伴糖尿病，且伴糖尿病者進行再灌注治療后的總體預后更差，但糖尿病對缺血再灌注損傷的直接影響尚無定論，有研究表明糖尿病對再灌注損傷的作用和糖尿病的病程進展有關(guān)，但其具體過程和機制尚不明確。
　　目的:(1)分別觀察早期（2周）和進展期（12周）的Ⅰ型糖尿病對小鼠心肌缺血再灌

2、注損傷的影響;(2)研究在早期（2周）和進展期（12周）的Ⅰ型糖尿病中，心肌缺血再灌注損傷后自噬活性的變化情況。
　　方法:在STZ誘導的Ⅰ型糖尿病的早期（2周）和進展期（12周）分別建立小鼠在體心肌缺血再灌注損傷模型，應用TTC染色和血清cTnⅠ含量測定評價心肌損傷，TUNEL染色和caspase-3測細胞凋亡，Western Blot評估自噬活性。結(jié)果:1）對比非糖尿病組，2周糖尿病組在心肌缺血再灌注后心梗面積和血清cTnⅠ含

3、量明顯降低，細胞凋亡明顯減少，自噬活性輕度上調(diào);2）對比非糖尿病組，12周糖尿病組心肌在缺血再灌后心梗面積和cTnⅠ顯著升高，細胞凋亡明顯增加，自噬活性顯著降低。
　　結(jié)論:早期糖尿病對心肌缺血再灌損傷有保護作用，而進展期糖尿病的心肌則更容易受到缺血再灌注的損傷，這可能與早期糖尿病上調(diào)心肌自噬活性，而進展期糖尿病下調(diào)自噬活性有關(guān)。
　　第二部分 Sirt1在Ⅰ型糖尿病對缺血再灌注損傷后心肌自噬活性的調(diào)節(jié)中的作用及其機制研究<

4、br>　　研究背景:我們的前期研究表明自噬活性的變化可能是不同時期的Ⅰ型糖尿病對心肌缺血再灌注損傷敏感性不同的重要原因。但不同時期糖尿病差異性調(diào)控自噬的機制尚未可知。有研究報道Sirt1在饑餓誘導的心肌細胞自噬中發(fā)揮了重要作用。我們推測Sirt1在不同時期糖尿病對自噬的差異性調(diào)節(jié)中發(fā)揮了作用目的:1）觀察Sirt1敲除對心肌缺血再灌注損傷后自噬活性的調(diào)節(jié)作用及其對心肌損傷的影響;2）觀察心肌特異性Sirt1敲除后，早期糖尿病對心肌缺血再

5、灌損傷的保護作用是否依然存在;3）觀察在進展期糖尿病動物的心肌中上調(diào)Sirt1對心肌自噬活性以及缺血再灌注損傷的影響及其機制。
　　方法:通過誘導型心肌特異性Sirt1敲除模型，在非糖尿病小鼠和2周糖尿病小鼠中分別研究Sirt1在心肌缺血再灌注過程中對自噬的調(diào)節(jié)作用及其對心肌損傷的影響;通過心肌內(nèi)注射攜帶Sirt1基因的慢病毒載體上調(diào)心肌Sirt1表達，研究其對12周糖尿病心肌缺血再灌注后自噬活性和心肌損傷的影響。
　　結(jié)果

6、:1）Sirt1敲除增加了缺血再灌注損傷后的心梗面積和細胞凋亡，并通過調(diào)節(jié)FoxO1-Rab7和AMPK-mTOR信號通路，下調(diào)了心肌自噬活性;2）Sirt1敲除后，2周糖尿病組心肌缺血再灌注損傷后心梗面積和細胞凋亡數(shù)與非糖尿病組無差異;3）在12周糖尿病小鼠的心肌中，Sirt1過表達能上調(diào)自噬活性，減少再灌注損傷后的細胞凋亡，有減小心梗面積的趨勢但無統(tǒng)計學差異。
　　結(jié)論:Sirt1在不同時期Ⅰ型糖尿病對缺血再灌注損傷后心肌自噬

7、活性的調(diào)節(jié)中發(fā)揮了重要作用。
　　第三部分遠端缺血期處理聯(lián)合遠端缺血后處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用及其機制研究
　　研究背景:遠端缺血處理是一種無創(chuàng)的內(nèi)源性心肌保護措施，其在缺血前(遠端缺血預處理(RIPC))，缺血時（遠端缺血期處理（RIPerC））和再灌早期（遠端缺血后處理（RIPostC））都能保護心肌免受缺血再灌注損傷(IRI)。RIPerC和RIPostC由于無需預測缺血事件，有更好的實用價值，而它們的聯(lián)

8、合作用尚未被報道過。
　　目的:本研究旨在:1）比較RIPerC與RIPostC心肌保護作用的強度;2）觀察RIPerC聯(lián)合RIPostC是否可以產(chǎn)生疊加效應，對心肌缺血再灌注損傷發(fā)揮更強的保護作用;3）發(fā)掘RIPerC和RIPostC各自以及聯(lián)合運用時，對抗心肌缺血再灌注損傷的潛在機制，探討其異同。
　　方法:將雄性SD大鼠隨機分成五組:1）假手術(shù)組;2）缺血再灌(IR)組:結(jié)扎前降支對大鼠心肌進行缺血40min/再灌注1

9、20min處理。3）RIPerC組:IR+自缺血開始時給予大鼠雙下肢四個循環(huán)的5min缺血/5min再灌注處理。4）RIPostC組:IR+自心肌再灌注開始時給予大鼠雙側(cè)下肢四個循環(huán)的5min缺血/5min再灌注處理;5）聯(lián)合組（RIPerC+ RIPostC）;試驗通過TTC和TUNEL染色分別評價梗死面積和心肌凋亡，壓力導管測心功能，ELISA法測血清cTnⅠ和炎癥因子含量，Western Blot法檢測相關(guān)蛋白表達。
　　結(jié)

10、果:對比IR組，RIPerC和RIPostC都能有效降低缺血再灌注損傷后的心梗面積，減少細胞凋亡和炎癥反應，但它們的聯(lián)合運用并不能進一步改善以上指標。Akt，ERK1/2，and GSK-3β和STAT-3的磷酸化水平在RIPerC、RIPostC以及RIPerC+RIPostC中都發(fā)生了上調(diào)，但三者之間并無差異。
　　結(jié)論:RIPerC和RIPostC通過“RISK”和“SAFE”信號通路的激活對心肌缺血再灌注損傷起保護作用，它