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文檔簡介
1、目的:探討中波紫外線照射后不同時(shí)間點(diǎn)體外培養(yǎng)的HaCaT細(xì)胞MAPK信號(hào)通路受調(diào)控效應(yīng)。
方法:1.5、4.5、7.5、10、20、30、50mJ/cm2中波紫外線照射HaCaT細(xì)胞后8h,對(duì)照組細(xì)胞除不進(jìn)行 UVB照射外,其他處理同各劑量 UVB組,蛋白免疫印跡法測(cè)定ERK1/2、JNK和p38蛋白表達(dá)及磷酸化水平;50 mJ/cm2中波紫外線照射HaCaT細(xì)胞,蛋白免疫印跡法測(cè)定照射后2、4、8、12h4個(gè)時(shí)間點(diǎn),細(xì)胞ER
2、K1/2、JNK和p38蛋白表達(dá)及磷酸化水平。使用Quantity One軟件計(jì)算目的條帶吸光度,以相應(yīng)蛋白條帶的吸光度值與GAPDH蛋白內(nèi)參條帶吸光度值的比值表示相對(duì)蛋白含量。
結(jié)果:7.5、10、20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT細(xì)胞后8 h,ERK1/2、JNK磷酸化水平明顯上調(diào)(P<0.05),20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT細(xì)胞后p38磷酸化水平上調(diào)顯著(P<0.05),且都在5
3、0 mJ/cm2照射后效應(yīng)最為顯著(P<0.05)。50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT細(xì)胞后8h,ERK1/2磷酸化產(chǎn)物水平出現(xiàn)上調(diào),在處理后的第12小時(shí),與對(duì)照組(10.277±0.320)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(44.844±2.023,P<0.05),而p38和JNK磷酸化產(chǎn)物水平在照射后2 h即開始上調(diào)(P<0.05),第4、8、12小時(shí),p38和 JNK與對(duì)照相比,UVB照射后雖仍然存在著顯著地磷酸化水平差異(P<0.0
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