基質金屬蛋白酶-9對多發(fā)性硬化復發(fā)診斷的臨床意義研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、1、目的:
  多發(fā)性硬化(Multiple sclerosis. MS)是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)慢性炎癥脫髓鞘疾病,它的典型病理特征是炎性細胞浸潤、髓鞘脫失、軸索變性以及膠質細胞增生等,目前許多研究表明多發(fā)性硬化早期即存在血腦屏障破壞。
  基質金屬蛋白酶-9(Matrix metalloproteinases-9. MMP-9)是一類鋅離子依賴的蛋白酶,具有破壞血腦屏障,降解細胞外基質、髓鞘堿性蛋白的作用,可以導致血管內皮細胞

2、通透性增高,進而導致T淋巴細胞等炎癥細胞穿透血管基底膜進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。MS血腦屏障的破壞、炎性細胞浸潤、髓鞘降解以及軸索的損傷等主要病理過程均與MMP-9活性異常增高有關。
  頸椎病神經(jīng)根型發(fā)病率為50-60%,是由于頸椎間盤向側后方突出、關節(jié)增生及肥大,刺激或壓迫神經(jīng)根所致。臨床上開始多為頸肩痛,并向上肢放射,皮膚可有麻木、過敏等感覺異常,頸椎病神經(jīng)根型臨床表現(xiàn)與多發(fā)性硬化頗為相似。
  血腦屏障破壞在MS的病理生理中

3、起重要作用,血管通透性的改變早于MS影像學的特征性變化。核磁共振(MRI)增強掃描可見活動性病灶強化,這與病變血管周圍炎性改變,血腦屏障破壞,血管通透性升高,造影劑外滲有關,MMP-9是引起血腦屏障破壞的重要因素,MS患者外周血MMP-9突然升高與新病灶的形成有關,故推斷MS復發(fā)期較緩解期的MMP-9表達不同。
  本研究旨在探討基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)的檢測能否成為自身免疫性疾病多發(fā)性硬化(MS)復發(fā)-緩解型(R-R型)

4、和頸椎病神經(jīng)根型相鑒別的一種方法,以及MMP-9的檢測對判斷MS的復發(fā)和緩解是否具有臨床意義。
  2、方法:
  2.1、研究分組:
  本研究分別對經(jīng)CT檢查、肌電圖檢查及核磁共振掃描已確診的MS(R-R型)患者26例(復發(fā)期和緩解期),頸椎病神經(jīng)根型患者30例(復發(fā)期和緩解期),正常對照組30例共5組分別抽取不加抗凝的靜脈血2ml送MMP-9檢測。
  2.2、試驗儀器:
  MMP-9檢測所選用的設

5、備主要有酶標儀、洗板機、數(shù)字顯示隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱、離心機、移液槍、漩渦混合器、烘箱、分液器及微量電動組織勻漿器等。
  2.3、試驗過程:
  本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人MMP-9單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的MMP-9與單抗結合,加入生物素化的抗人MMP-9,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,最后加終止液硫酸,在450n

6、m處測OD值,MMP-9濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中MMP-9濃度,將所獲得的數(shù)據(jù)再進行統(tǒng)計學分析。
  3、結果:
  3.1、MS(R-R型)患者其復發(fā)期和緩解期的MMP-9分別與正常對照組MMP-9比較均有統(tǒng)計學差異。
  3.2、頸椎病神經(jīng)根型患者其復發(fā)期和緩解期的MMP-9分別與正常對照組MMP-9比較沒有統(tǒng)計學差異。
  3.3、MS(R-R型)患者其復發(fā)期和緩解期的MMP-9分別

7、與頸椎病神經(jīng)根型患者其復發(fā)期和緩解期的MMP-9比較均有統(tǒng)計學差異。
  3.4、MS患者的復發(fā)期與緩解期的MMP-9比較,有統(tǒng)計學差異。
  4、結論:
  4.1、MMP-9的檢測對于MS(R-R型)和頸椎病神經(jīng)根型的鑒別具有臨床意義。
  4.2、對于MS(R-R型)患者定期復查MMP-9可以早期判斷及預防有無疾病復發(fā),為積極診斷及治療提供幫助。
  4.3、MMP-9的檢測對于頸椎病神經(jīng)根型患者無現(xiàn)

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