1、目的:為了進(jìn)一步補(bǔ)充和完善我國(guó)靜注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin，IVIG)(pH4)制品的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系，分別建立IVIG中抗體的多樣性和Fc段（Fragment crystallizable region，F(xiàn)c region）生物活性檢測(cè)方法;并利用上述建立的方法，開展我國(guó)主要血液制品廠家IVIG制品的抗體多樣性及Fc段功能的研究。本研究為進(jìn)一步保障我國(guó)IVIG制品的質(zhì)量提供技術(shù)支撐與數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

2、r>　　方法:1、利用雙向電泳技術(shù)結(jié)合蛋白免疫印跡方法，以大腸桿菌O157∶H7總蛋白為抗原，開展我國(guó)IVIG制品抗體譜的多樣性研究，并利用質(zhì)譜方法對(duì)IVIG的目標(biāo)抗原進(jìn)行鑒定;
　　2、優(yōu)化藥典載錄的IVIG Fc段生物學(xué)活性（激活補(bǔ)體活性）檢測(cè)方法，開展我國(guó)IVIG制品Fc段激活補(bǔ)體活性的研究;
　　3、建立基于流式細(xì)胞術(shù)的IVIG Fc段生物學(xué)活性（結(jié)合受體活性）分析方法，開展我國(guó)IVIG制品Fc段結(jié)合受體活性的研究;

3、利用高效液相色譜方法分析IVIG中IgG二聚體含量，比較IgG二聚體含量與Fc段結(jié)合受體活性的關(guān)系。
　　結(jié)果:本研究成功建立了穩(wěn)定性良好的IVIG抗體譜及Fc段生物學(xué)活性評(píng)價(jià)方法，并利用該方法對(duì)國(guó)內(nèi)外廠家IVIG制品分析，結(jié)果如下:
　　1、國(guó)內(nèi)8個(gè)廠家IVIG制品識(shí)別反應(yīng)的抗原蛋白點(diǎn)為156±48個(gè)，而國(guó)外Octapharma公司的IVIG識(shí)別反應(yīng)的抗原點(diǎn)為124個(gè)。選取33個(gè)與IgG發(fā)生免疫反應(yīng)的抗原蛋白進(jìn)行質(zhì)譜分析，

4、經(jīng)鑒定為29種大腸桿菌蛋白，且這些蛋白在多種病原微生物中高度保守;
　　2、所有廠家IVIG制品中均檢測(cè)到有針對(duì)白喉類毒素的Fc段激活補(bǔ)體活性，均高于60％，符合《歐洲藥典》的檢定要求，但各廠家IVIG Fc段激活補(bǔ)體活性各不相同;國(guó)內(nèi)各廠家IVIG Fc段激活補(bǔ)體活性與A廠家比較，F(xiàn)*＞H*＞G*＞A＞C＞I＞D*＞E*＞B*（“*”表示p＜0.01，差異顯著）;
　　3、所有廠家IVIG制品Fc段結(jié)合受體活性各不相同，同

5、一廠家不同批次IVIG樣品Fc段結(jié)合受體活性也有所不同，但均高于60％;與A廠家比較，部分廠家呈現(xiàn)顯著性差異;
　　4、IVIG制品中二聚體含量與其Fc結(jié)合受體能力無(wú)相關(guān)性。
　　結(jié)論:1、本研究建立的針對(duì)IVIG的抗體譜多樣性和Fc段生物學(xué)活性的評(píng)價(jià)體系，可有效用于IVIG制品針對(duì)病原微生物抗體多樣性的檢測(cè)評(píng)價(jià)，以及從Fc段結(jié)合受體、激活補(bǔ)體能力兩個(gè)方面分析IVIG Fc段功能，上述評(píng)價(jià)體系為保障IVIG的有效性提供了技術(shù)

6、支撐;
　　2、利用建立的方法對(duì)我國(guó)主要廠家的IVIG制品進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果表明參與研究的國(guó)內(nèi)IVIG制品中均具有針對(duì)大腸桿菌O157∶H7的廣譜抗體，但識(shí)別抗原的數(shù)量、種類存在差異;各廠家IVIG制品Fc段生物學(xué)活性均不相同，部分廠家存在顯著性差異。說(shuō)明目前市售的IVIG制品臨床有效性可能存在差異;
　　3、補(bǔ)充并完善現(xiàn)有的血漿蛋白質(zhì)品質(zhì)量評(píng)價(jià)體系，有助于更加深入分析產(chǎn)品特點(diǎn)，為指導(dǎo)臨床選擇用藥、提升血漿蛋白制品質(zhì)量提供保障