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文檔簡介
1、目的:
研究巨細胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)肝炎脾虛濕困證患兒血漿和尿液的代謝特征、受干擾的代謝物和代謝通路,探討CMV肝炎脾虛濕困證的證候實質。
方法:
選取符合診斷標準的CMV肝炎脾虛濕困證患兒20例設為脾虛濕困組。同時選取同時期同年齡段正常兒童20例設為正常組。采集兩組兒童的血漿和尿液,應用氣相色譜-三重四級桿質譜儀(gas chromatography-mass spectrom
2、etry,GC-MS)檢測代謝產(chǎn)物,利用XCMS軟件進行數(shù)據(jù)提取和數(shù)據(jù)轉化,導入SIMCA-P軟件進行多變量分析,并建立主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判別分析(Orthogonal PartialLeast Squares Discriminant Analysis,OPLS-DA)數(shù)學模型,篩選能有效表征嬰兒CMV肝炎脾虛濕困證的差異性代謝物,并使用MetaboAnal
3、yst分析可能涉及的相關代謝通路來綜合評價CMV肝炎脾虛濕困證的證候本質。
結果:
1.血漿樣本代謝組學模式分析結果顯示,在所構建的PCA及OPLS-DA模型中正常組血漿樣本提取物與嬰兒CMV肝炎脾虛濕困證組樣本能夠良好區(qū)分,說明脾虛濕困證組的代謝物特征與正常組具有明顯差異。初步鑒定了22個差異性代謝物作為潛在的生物標記物,其中乳酸、L-丙氨酸、辛酸、L-異亮氨酸、L-脯氨酸、甘氨酸、絲氨酸、L-蘇氨酸、氨基丙二酸、
4、蛋氨酸、焦谷氨酸、戊酸、L-谷氨酸、鳥氨酸、L-賴氨酸、L-酪氨酸、肌醇、硬脂酸、L-色氨酸和膽固醇在CMV肝炎脾虛濕困證患兒血漿中呈上調趨勢,而3-羥基丁酸、乙二胺四乙酸在CMV肝炎脾虛濕困證患兒血漿中呈下調趨勢。
2.尿液樣本代謝組學模式分析結果顯示,在所構建的PCA及OPLS-DA模型中正常組尿液樣本提取物與嬰兒CMV肝炎脾虛濕困證組樣本能夠良好區(qū)分,說明脾虛濕困證組的代謝物特征與正常組具有明顯差異。初步鑒定了9個差異性
5、代謝物作為潛在的生物標記物,其中甘氨酸、L-蘇氨酸、L-賴氨酸、D-甘露醇、D-葡萄糖酸、棕櫚酸、尿酸、硬脂酸在CMV肝炎脾虛濕困證患兒尿液中呈上調趨勢,而檸檬酸在CMV肝炎脾虛濕困證患兒尿液中呈下調趨勢。
結論:
1.本實驗所采用的GC-MS技術能夠對CMV肝炎患兒的血漿、尿液進行代謝輪廓分析,并且能夠區(qū)分和闡釋脾虛濕困證組與正常組不同的代謝特征。
2.CMV肝炎脾虛濕困證患兒血漿和尿液中主要存在氨基酸代
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