1、武漢理工大學(xué)碩士學(xué)位論文枯草芽孢桿菌Mrp系統(tǒng)基因的克隆與表達(dá)研究姓名：郭小明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：應(yīng)用化學(xué)指導(dǎo)教師：謝浩200911013MBP(maltose—bindingprotein)蛋白作為膜蛋白表達(dá)伴侶的研究：本研究是基于本實(shí)驗(yàn)室已有的pMALp4X質(zhì)粒，構(gòu)建pMALp4X[MBPNupC]質(zhì)粒和pMALp4X[MBPMrpD]。pMALp4x質(zhì)粒中含有MBP基因。具體步驟為，利用PCR技術(shù)將mrpD和nupC基因分別從

2、含有相應(yīng)基因的質(zhì)粒擴(kuò)增出來，經(jīng)酶切消化后作為插入片段，插入到pMALp4x載體中，構(gòu)建pMALp4X[MBPNupC]和pMALp4X[MBPMrpD】重組質(zhì)粒。含有重組質(zhì)粒pMALp4X[MBPNupC]和pMALp4X[MBPMrpD]的BL21菌株在M9培養(yǎng)基培養(yǎng)，加IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)重組膜蛋白的研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明N端結(jié)合了MBP的MBP—NupC和MBPMrpD能夠進(jìn)行異源表達(dá)，說明MBP能夠作為表達(dá)伴侶促進(jìn)膜蛋白表達(dá)。關(guān)鍵詞