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![高親和力IgE受體FcεR1與非酒精性脂肪肝病關(guān)系的實驗研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/ad0c9968-f8ec-4dcb-bbe6-90935b90d0a5/ad0c9968-f8ec-4dcb-bbe6-90935b90d0a51.gif)
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文檔簡介
1、[背景/目的]
非酒精性脂肪肝病(nonalcoholicfattyliverdisease,NAFLD)是常見以脂質(zhì)堆積、酶學(xué)指標持續(xù)異常為特點的臨床病理表現(xiàn),是慢性肝臟疾病中的一個常見原因,是世界上一個重大的問題。調(diào)查結(jié)果顯示,肥胖促進NAFLD病情加重。免疫球蛋白E(IgE)是介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的一種免疫球蛋白,高親和力IgE受體(FcεR1)是IgE的受體之一。Yun-JungLee等人做了一項研究,檢測隨機抽取的50名
2、肥胖婦女的血漿IgE,體質(zhì)量和體重指數(shù)(BMI),粗略估計脂肪的含量,對此數(shù)據(jù)進行分析,發(fā)現(xiàn)血漿IgE水平隨其他三項指標的升高而降低。并且做了相關(guān)動物實驗,發(fā)現(xiàn)高脂飲食(HFD)誘導(dǎo)的FcεR1-/-肥胖小鼠進食量增加和能量代謝降低,導(dǎo)致體質(zhì)量增加。本研究旨在通過HFD誘導(dǎo)小鼠NAFLD模型,探討FcεR1在NAFLD發(fā)生發(fā)展中的作用。
[方法]
1.NAFLD模型的建立及指標檢測:隨機選取野生型C57BL/6J和I
3、gE受體敲除FcεR1-/-小鼠各10只,分為野生型組(WT)和基因敲除組(FcεR1-/-),均給予HFD喂養(yǎng),在每周一定的時間稱取其體質(zhì)量。喂養(yǎng)12周后,小鼠禁食12h,稱取體質(zhì)量后處死取材。取全血,離心后取血漿,用生化檢測儀檢測血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)等指標。馬上快速剪斷肝血管并取出肝臟,稱取重量后分別制成組織石蠟切片和冰凍切片,分別用于HE、masson和油紅O染色,剩
4、余部分置于-80℃擱置,用于檢測肝組織中TG、Ⅰ型膠原(collagenⅠ)和Ⅲ型膠原(collagenⅢ)等指標。
2.胰島素耐受實驗(ITT):HFD喂養(yǎng)小鼠第10周時,禁食6h,腹部打入胰島素(0.66IU/kg),打的同時開始計時,分別于0、30、60、90、120、150min用血糖針扎尾取血,用血糖儀檢測血糖值,根據(jù)系列數(shù)據(jù)作ITT曲線,觀察小鼠對胰島素的耐受情況。
3.葡萄糖耐受實驗(GTT):HFD喂
5、養(yǎng)小鼠第11周時,禁食12h,腹部打入葡萄糖(2g/kg),打的同時開始計時,分別于0、30、60、90、120、150min用血糖針扎尾取血,檢測血糖值,根據(jù)系列數(shù)據(jù)作GTT曲線,觀察小鼠對葡萄糖的控制情況。
[結(jié)果]
1.體質(zhì)量和肝臟體重比的比較結(jié)果:與WT小鼠相比,F(xiàn)cεR1-/-小鼠體質(zhì)量增長速度和肝臟體重比均明顯增加。
2.肝功能和肝組織纖維化的比較結(jié)果:與WT小鼠相比,F(xiàn)cεR1-/-小鼠血漿A
6、LT和AST水平升高,肝組織collagenⅢ含量增加,collagenⅠ含量無明顯變化,肝組織HE染色提示小鼠肝細胞腫脹及空泡樣變較重,肝組織masson染色提示肝臟中纖維生成和堆積量增多,且陽性面積比增加。
3.脂質(zhì)代謝的比較結(jié)果:與WT小鼠相比,F(xiàn)cεR1-/-小鼠血漿TG和TC水平顯著升高,小鼠肝組織TG堆積量增加,油紅O染色提示肝臟脂質(zhì)堆積程度較重,且陽性面積比增加。
4.ITT和GTT的比較結(jié)果:WT和F
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