高效氯氰菊酯降解菌的分離、鑒定及特性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、從茶園、田地、桔園等常施用農(nóng)藥的環(huán)境中采集多份土壤樣品,以高效氯氰菊酯為碳源構(gòu)成選擇壓力,經(jīng)液體搖瓶富集和多平板聯(lián)用兩種篩選程序,共篩選了280株微生物,獲得9株高效氯氰菊酯降解菌。高效氯氰菊酯降解菌培養(yǎng)6d后,對100 mg/L的底物,降解率均可達到60%左右;各菌株的菌落形態(tài)差異較大;經(jīng)簡單染色、革蘭氏染色后觀察菌體形態(tài)為桿狀、短桿狀,均為革蘭氏陰性。挑選三株菌落形態(tài)有代表性的高效氯氰菊酯降解菌進行16S rDNA測序及比對,其中兩

2、株屬于假單胞菌屬(16S rDNA序列同源性為98%~99%),一株屬于根瘤菌屬(16S rDNA序列同源性為98%~99%)。根瘤菌屬微生物降解高效氯氰菊酯尚屬首次報道。將此菌株命名為CY22-7.3,并進一步研究其降解特性。 菌株CY22-7.3在無額外營養(yǎng)物質(zhì)情況下,經(jīng)100mg/L高效氯氰菊酯誘導,培養(yǎng)24 h后進入降解階段;培養(yǎng)6d后,降解了約60%的高效氯氰菊酯。在添加了外源營養(yǎng)物質(zhì)(如,酵母提取物)后,降解率提升至

3、80%左右。菌株能耐受的底物濃度在200 mg/L~300 mg/L之間,對聯(lián)苯菊酯降解率較低;最佳的降解pH在6.0左右,較好的通氣條件能夠大幅度促進高效氯氰菊酯的降解;溫度適應(yīng)范圍廣,20℃~30℃均能保持較強的降解能力。 經(jīng)超聲波破碎提取胞內(nèi)粗酶液;硫酸銨沉淀胞外蛋白,經(jīng)透析除鹽后作為胞外粗酶液。兩者同時于30℃水浴中作用于50 mg/L高效氯氰菊酯8h,結(jié)果胞內(nèi)粗酶液降解了約40%的高效氯氰菊酯,而胞外粗酶液降解了約6%

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