1、微小RNA（microRNA）是一類長(zhǎng)度大約22個(gè)堿基，在進(jìn)化中高度保守的非蛋白質(zhì)編碼的內(nèi)源性小分子RNA。它是一種具有強(qiáng)大調(diào)節(jié)作用的新型基因分子。microRNA可以在所有細(xì)胞類型中表達(dá)，在細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、凋亡中均參與其中。作為一個(gè)重要的微小RNA，miR-146家族在各種生理及病理過(guò)程中參與重要的轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)已經(jīng)被廣泛報(bào)道。miR-146a在糖尿病性視網(wǎng)膜病變的過(guò)程中的表達(dá)變化也有相關(guān)的報(bào)道。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道不能確定miR-146a在糖

2、尿病性視網(wǎng)膜病變的表達(dá)變化情況。
　　目的：
　　本研究通過(guò)對(duì)糖尿病性視網(wǎng)膜病變的不同分期miR-146a表達(dá)進(jìn)行對(duì)比，初步研究糖尿病性視網(wǎng)膜病變的分期同miR-146a表達(dá)變化的關(guān)系，探討miR-146a能否成為糖尿病性視網(wǎng)膜病變的診斷工具。
　　方法：
　　1.對(duì)已確診的2型糖尿病患者根據(jù)眼底病變的情況進(jìn)行分類，從0期至Ⅳ分為5組，共33例，排除眼底病變不同各組患者無(wú)差異。同時(shí)選取健康人對(duì)照組。對(duì)目的組及對(duì)照

3、組進(jìn)行靜脈采血。
　　2.分離靜脈血，利用試劑盒提取標(biāo)本血漿中的 microRNA。對(duì)取得microRNA利用PloyA進(jìn)行加尾，并對(duì)加尾的產(chǎn)物進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)樣本miR-146a的相對(duì)表達(dá)含量。
　　3.對(duì)實(shí)時(shí)熒光定量 PCR的產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測(cè)，驗(yàn)證所得到的產(chǎn)物是否為目的產(chǎn)物。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)整理數(shù)據(jù)，應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件 SPSS19.0處理數(shù)據(jù)，采用單因素方差分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
　　結(jié)果：

4、r>　　1.根據(jù)電泳結(jié)果分析，熒光定量 PCR的產(chǎn)物在目的條帶范圍，符合實(shí)驗(yàn)要求。證明引物具有特異性。
　　2.溶解曲線和擴(kuò)增曲線結(jié)果也證明引物的特異性好，符合實(shí)驗(yàn)要求。引物的擴(kuò)增效率同樣在可信區(qū)間范圍內(nèi)。
　　3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析miR-146a的相對(duì)表達(dá)含量，將糖尿病性視網(wǎng)膜病變的0期與健康對(duì)照組相比，血漿 miR-146a的表達(dá)水平有升高趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。糖尿病性視網(wǎng)膜病變Ⅰ~Ⅳ期分別與健康對(duì)照組相比，m

5、iR-146a的表達(dá)水平有下降趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。糖尿病性視網(wǎng)膜病變各分期之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-146a表達(dá)在糖尿病視網(wǎng)膜病變各組之間，目的組與對(duì)照組之間，未能得出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，尚不能確認(rèn)miR-146a在糖尿病視網(wǎng)膜病變的表達(dá)情況。
　　2.不同糖尿病患者及健康人之間miR-146a表達(dá)的個(gè)體差異較大。
　　3.在本研究所檢測(cè)的樣本中未能體