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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)功能缺陷對(duì)非小細(xì)胞肺癌免疫微環(huán)境的影響,為非小細(xì)胞肺癌免疫治療提供有意義的指導(dǎo)。
方法:
1.收集天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院非小細(xì)胞肺癌石蠟標(biāo)本和對(duì)應(yīng)組織標(biāo)本各40例,通過(guò)免疫組化法檢測(cè)錯(cuò)配修復(fù)蛋白(MLH1、MSH2、MSH6、PMS2)表達(dá)情況,PCR-SSCP法檢測(cè)微衛(wèi)星不穩(wěn)定情況(4個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn) D13S170、D9S162、D17S786、D10S185),探討兩種方法檢測(cè)錯(cuò)配修
2、復(fù)系統(tǒng)功能缺陷情況是否一致。
2.收集天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院非小細(xì)胞肺癌石蠟標(biāo)本109例,通過(guò)免疫組化法檢測(cè)錯(cuò)配修復(fù)蛋白(MLH1、MSH2、MSH6、PMS2)表達(dá)情況和腫瘤組織內(nèi)免疫細(xì)胞浸潤(rùn)情況,分析錯(cuò)配修復(fù)缺陷與腫瘤組織免疫細(xì)胞浸潤(rùn)的相關(guān)性。
3.收集天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院新鮮非小細(xì)胞肺癌組織24例,利用免疫組化法檢測(cè)腫瘤組織錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)缺陷情況,并通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)腫瘤組織內(nèi)浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞表面免疫檢查點(diǎn)分子的表達(dá)情
3、況,分析錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)缺陷與浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞表面免疫檢查點(diǎn)分子表達(dá)的相關(guān)性。
結(jié)果:
1.通過(guò)免疫組化法檢測(cè)錯(cuò)配修復(fù)蛋白的表達(dá)和PCR-SSCP法檢測(cè)MSI,利用兩種方法判斷錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)的功能狀態(tài)。兩種方法檢測(cè)錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)缺陷的復(fù)合率為92%,有很好的一致性(P<0.001)。
2.通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)pMMR組與dMMR組免疫細(xì)胞浸潤(rùn)情況,結(jié)果表明在dMMR組中,CD3+、CD4+、CD8+、CD20+、CD
4、68+、Foxp3+細(xì)胞浸潤(rùn)均增加,其中肺腺癌中CD3+、CD4+、CD8+、Foxp3+、CD68+細(xì)胞浸潤(rùn)顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001;P=0.027;P<0.001;P=0.046;P=0.012);肺鱗癌中CD3+、CD8+細(xì)胞浸潤(rùn)顯著增加(P=0.004;P=0.009)。
3.通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T淋巴細(xì)胞表面PD-1、PD-L1、CTLA-4、LAG-3表達(dá)情況,其中PD-1和PD-L1在dMMR組C
5、D8+T細(xì)胞表面表達(dá)顯著增加(P=0.033;P=0.024),而在CD4+T細(xì)胞表面表達(dá)未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
CTLA-4和LAG-3的表達(dá)在dMMR組和pMMR組間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)論:
存在錯(cuò)配修復(fù)缺陷的非小細(xì)胞肺癌組織內(nèi)有大量的免疫細(xì)胞浸潤(rùn),并且 T淋巴細(xì)胞表面的免疫檢查點(diǎn)分子PD-1/PD-L1高表達(dá)。本研究提示錯(cuò)配修復(fù)缺陷影響非小細(xì)胞肺癌的免疫微環(huán)境,對(duì)上述NSCLC患者采用免疫檢查點(diǎn)抑制劑治
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