1、研究目的:近年來(lái)，研究表明，細(xì)菌通過多種途徑加強(qiáng)自身抗藥性，包括分泌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶、碳青霉烯酶等多種酶類對(duì)抗生素進(jìn)行水解，通過基因突變改變藥物作用靶位，誘導(dǎo)膜孔蛋白缺失或移位導(dǎo)致抗菌藥物不能有效進(jìn)入細(xì)菌，不同菌株之間轉(zhuǎn)移耐藥基因抵抗藥效，或者通過固有的主動(dòng)外排泵系統(tǒng)排出抗生素；這些不同的代謝途徑造成了全球性蔓延的細(xì)菌的抗生素耐藥現(xiàn)象。目前，多種臨床常見病原菌如金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、大腸桿菌等均出現(xiàn)了氨基糖苷類、

2、青霉素、頭孢類抗生素單一耐藥株甚至多重耐藥菌株，且抗菌藥物的研發(fā)周期遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及耐藥菌株的出現(xiàn)速度，發(fā)現(xiàn)或篩選能夠增強(qiáng)藥物敏感性的化合物，是逆轉(zhuǎn)耐藥菌株耐藥性的簡(jiǎn)便快捷的手段。具有高效抗瘧作用的青蒿琥酯，不僅能夠迅速控制重癥瘧疾，且能有效抗菌、抗炎和抗菌增敏。因此，本研究擬探索青蒿琥酯在獨(dú)立抗菌以及輔助抗菌方面的潛在藥用價(jià)值，通過檢測(cè)青蒿琥酯協(xié)同常用抗菌藥物如青霉素鈉/頭孢曲松鈉對(duì)多種臨床常見的革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌的抗菌作用，為有效降低臨

3、床病原菌耐藥性，降低醫(yī)院感染率提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　研究方法:選取6種病原菌如金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、志賀氏菌、銅綠假單胞菌ATCC27853和銅綠假單胞菌臨床分離株，聯(lián)合藥品選用青霉素鈉或頭孢曲松鈉，連續(xù)二倍稀釋法檢測(cè)青蒿琥酯在單獨(dú)或聯(lián)合用藥下，對(duì)各種臨床分離病原菌株的抑菌作用。實(shí)驗(yàn)分組具體為：菌液對(duì)照組、青蒿琥酯組、青霉素鈉組、頭孢曲松鈉組、青蒿琥酯+青霉素鈉組和青蒿琥酯+頭孢曲松鈉組，給藥濃度設(shè)定為最低藥

4、物濃度的青蒿琥酯聯(lián)用低于MIC劑量的青霉素鈉或頭孢曲松鈉，通過測(cè)定6個(gè)實(shí)驗(yàn)組的菌株動(dòng)態(tài)生長(zhǎng)曲線，評(píng)價(jià)青蒿琥酯體外的抗菌增敏效果；在此基礎(chǔ)上，選取銅綠假單胞菌ATCC27853菌株，在昆明種小鼠體內(nèi)檢測(cè)青蒿琥酯聯(lián)合頭孢曲松鈉的協(xié)同抗菌作用，通過腹腔注射銅綠假單胞菌ATCC27853和肌肉注射給藥，觀察受試小鼠生存狀況，測(cè)定細(xì)菌感染的最小致死量（MLD）和次一級(jí)致死劑量，以次一級(jí)致死劑量為依據(jù)建立銅綠假單胞菌ATCC27853感染小鼠模型，

5、通過檢測(cè)小鼠血液細(xì)菌數(shù)量，血清內(nèi)毒素(LPS)和細(xì)胞因子IL-17水平，評(píng)價(jià)體內(nèi)青蒿琥酯對(duì)頭孢曲松鈉抗菌增敏效果。
　　研究結(jié)果：青蒿琥酯體外單獨(dú)用藥時(shí)對(duì)6種病原菌均僅有微弱的抗菌作用，體外可明顯提高青霉素鈉對(duì)枯草芽孢桿菌和銅綠假單胞菌分離株的生長(zhǎng)抑制效果，增強(qiáng)志賀氏菌、銅綠假單胞菌ATCC27853和銅綠假單胞菌臨床分離株對(duì)頭孢曲松鈉的敏感性；與青霉素鈉，頭孢曲松鈉聯(lián)用時(shí)，相比抗生素的單獨(dú)使用能夠明顯延緩細(xì)菌生長(zhǎng)速度；青蒿琥酯聯(lián)

6、合頭孢曲松鈉體內(nèi)能協(xié)同降低小鼠血液細(xì)菌數(shù)量和血清LPS水平，升高血清IL-17水平，且協(xié)同效果均優(yōu)于青蒿琥酯或頭孢曲松鈉單獨(dú)使用的效果。
　　結(jié)論：青蒿琥酯能明顯增加金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、志賀氏菌、銅綠假單胞菌ATCC27853和銅綠假單胞菌臨床分離株對(duì)青霉素鈉和頭孢曲松鈉的敏感性，其中以青蒿琥酯聯(lián)合頭孢曲松鈉對(duì)銅綠假單胞菌的協(xié)同抑制作用最佳，青蒿琥酯聯(lián)合頭孢曲松鈉能夠顯著降低ATCC27853感染小鼠血液