1、目的：原人參二醇（protopanaxadiol，PPD）能夠抑制ATP結(jié)合膜蛋白B1（ATP-Binding Cassette Sub-Family B Member1，ABCB1）轉(zhuǎn)運(yùn)體，發(fā)揮逆轉(zhuǎn)耐藥的作用。課題組前期通過(guò)組合化學(xué)手段改造PPD的化學(xué)結(jié)構(gòu)，合成新的PPD系列衍生物。本研究對(duì)PPD衍生物逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，并闡明其對(duì)腫瘤耐藥的調(diào)控機(jī)制，為腫瘤的治療提供有效的增敏藥物。
　　方法：選取耐藥與相應(yīng)不耐藥腫瘤細(xì)

2、胞株2對(duì)，檢測(cè)細(xì)胞株中ABCB1的mRNA和蛋白表達(dá)水平；MTT比色法檢測(cè)PPD衍生物對(duì)腫瘤耐藥細(xì)胞及其母本的半數(shù)抑制濃度（half inhibitory concentration，IC50）；聯(lián)合應(yīng)用化療藥物，檢測(cè)PPD衍生物的逆轉(zhuǎn)倍數(shù)；過(guò)表達(dá)外源性ABCB1后，分析PPD衍生物的逆轉(zhuǎn)效果；檢測(cè)PPD衍生物對(duì)其余ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體活性的抑制活性；激光共聚焦顯微鏡定性觀察細(xì)胞中藥物的變化，流式細(xì)胞儀和熒光分光光度儀定量分析細(xì)胞中藥物濃度的變

3、化；細(xì)胞流出實(shí)驗(yàn)和ATPase活性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證PPD12對(duì)ABCB1的調(diào)控作用；裸鼠皮下成瘤，觀察PPD衍生物與化療藥物聯(lián)合應(yīng)用對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用。TUNEL和H&E染色檢測(cè)瘤體組織的變化。
　　結(jié)果：
　?。?）ABCB1的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平在腫瘤耐藥細(xì)胞株中表達(dá)顯著上調(diào)。PPD衍生物（PPD，PPD11，PPD12）對(duì)腫瘤耐藥細(xì)胞的IC50均大于6μM；
　?。?）5μM PPD12與阿霉素聯(lián)用后，阿霉素對(duì)KB/VCR的

4、IC50降低了12.92倍，逆轉(zhuǎn)活性高于5μM的PPD和PPD11。5μM PPD12對(duì)順鉑（不是ABCB1轉(zhuǎn)運(yùn)體底物）的逆轉(zhuǎn)活性弱。在MCF-7/ADM和HEK293/ABCB1細(xì)胞中，PPD12對(duì)阿霉素的逆轉(zhuǎn)作用強(qiáng)于PPD和PPD11。在ABCC1高表達(dá)細(xì)胞HL60/ADR和ABCG2高表達(dá)細(xì)胞S1-Mi-80中，PPD12的增敏作用較弱；
　　（3）激光共聚焦和流失檢測(cè)顯示，PPD12增加了阿霉素細(xì)胞內(nèi)的累積量，減緩了阿霉素