1、目的：
　　本課題探討類風濕性關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis，RA）大鼠早期主動脈血管損傷程度及他汀降脂藥對這種損傷的部分保護機制，從而為預防及治療RA所引發(fā)的動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，As）提供臨床用藥的實驗依據(jù)。
　　方法：
　　本實驗采用8周齡大小清潔級重量約190-220g的雄性Wistar大鼠，適應性飼養(yǎng)7日之后,開始造模。將做成的Ⅱ型膠原蛋白乳劑在實驗大鼠的背部離尾部兩

2、厘米皮下打入Ⅱ型膠原蛋白乳劑(0.2mL/只)，制作膠原誘導性關(guān)節(jié)炎(Collagen induced arthritis，CIA)大鼠模型，同時取10只大鼠于與CIA大鼠模型同一部位皮下打入相同量生理鹽水記作空白對照組（N組）。隨機將造模21d時呈現(xiàn)出二次反應的，并且關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分(Arthritis Index,AI)＞5的CIA大鼠分成兩組：類風濕關(guān)節(jié)炎組（RA組）及阿托伐他汀治療組（T組），每組各10只。把阿托伐他汀鈣膠囊內(nèi)的藥

3、粉置于生理鹽水中進行充分的溶解并搖勻，制成藥水用以給大鼠灌胃治療。造模后第21天起，T組大鼠用阿托伐他汀（10mg/kg·d）灌胃治療，持續(xù)用藥5周，同時N組及RA組用相同量的生理鹽水進行灌胃?？倢嶒炗^察周期為8周。觀察各實驗組大鼠的一般情況并用電子秤分別于造模前及實驗結(jié)束后稱量并記錄各實驗組大鼠的體重。實驗結(jié)束后，將大鼠腹腔麻醉，經(jīng)腹主動脈采血，離心后留取上層血清置于-80℃冰箱備檢，用于測定各實驗組大鼠的血脂各指標、血清妊娠相關(guān)血漿

4、蛋白-A（Pregnancy associated plasma protein-A，PAPP-A）水平、血清腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）水平的差異;取血后快速打開胸腔并統(tǒng)一取大鼠的胸主動脈，置于克氏液中，測量大鼠血管內(nèi)皮依賴性舒張功能；剩余主動脈經(jīng)固定、脫水、包埋用于HE染色觀察各組大鼠主動脈病理學變化，免疫組化觀察并半定量分析

5、主動脈內(nèi)皮細胞Bcl-2/Bax的表達，脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導的dUTP缺口末端標記法（TdT-mediated dUTP nick end labeling，TUNEL法）測定主動脈內(nèi)皮細胞凋亡指數(shù)；取大鼠膝關(guān)節(jié)的滑膜組織，固定、脫水、包埋制成蠟塊用于 HE檢測三組大鼠滑膜組織病理學變化。統(tǒng)計學處理：運用SPSS17.0 統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以均數(shù)±標準差((-X±s）表示，兩組間均數(shù)比較采用配對t檢驗，計數(shù)資料比較

6、采用X2檢驗，檢驗水準P＜0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：
　　1.當實驗結(jié)束時，觀察各組大鼠關(guān)節(jié)情況：N組大鼠運動量正常，沒有表現(xiàn)出關(guān)節(jié)紅腫和運動受限；RA組大鼠運動量減少，表現(xiàn)出關(guān)節(jié)紅腫和運動受限；T組大鼠活動量、關(guān)節(jié)腫脹度及活動障礙癥狀較RA組有所減輕，但仍存在關(guān)節(jié)腫脹及活動障礙。
　　2.各組大鼠體重的改變情況：造模前各實驗組大鼠重量（g)相比無明顯統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；實驗結(jié)束后，RA組及T組

7、大鼠重量都較 N組明顯降低（*P＜0.01，**P＜0.01)，但 T組大鼠重量比 RA組明顯要高（＃P<0.01）。
　　3.各實驗組大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜組織HE觀察結(jié)果：N組滑膜上皮細胞呈現(xiàn)整齊的分布排列；RA組滑膜組織呈乳頭狀增殖，滑膜上皮復層增殖，滑膜間質(zhì)內(nèi)大量淋巴細胞和漿細胞侵潤，大量新生血管生成，滑膜組織的表面不僅沉積有纖維素樣的物質(zhì)，并且在滑膜組織的間質(zhì)發(fā)生了纖維化；T組滑膜組織病變相對RA組有所緩解，但不明顯，仍呈現(xiàn)出病

8、理狀態(tài)。
　　4.各實驗組大鼠血脂各指標、血清PAPP-A、TNF-α和IL-1β水平變化情況：RA組PAPP-A、TNF-α及IL-1β均明顯高于N組(*P<0.01)，HDL-C明顯低于N組(*P<0.05)，而TC、TG、LDL-C無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）;應用阿托伐他汀治療后，T組TC、LDL-C、PAPP-A、TNF-α及IL-1β均明顯低于RA組(#P<0.05)，HDL-C明顯高于RA組(#P<0.05)，而TG

9、無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。
　　5.各實驗組大鼠的主動脈內(nèi)皮依賴性舒張功能狀況差異：RA組、T組舒張率（％）明顯低于N組（*P＜0.01，**P＜0.01）；應用阿托伐他汀治療后，T組舒張率（%）明顯大于RA組，具有顯著性差別（#P＜0.01）。
　　6.各組大鼠主動脈標本 HE鏡下監(jiān)測情況：N組血管內(nèi)皮、內(nèi)膜、中膜及外膜完全整齊無缺失，內(nèi)皮細胞無增生、無脫落，內(nèi)膜內(nèi)未見泡沫細胞形成、無淋巴細胞聚集，平滑肌細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)沒

10、有表現(xiàn)異常，動脈壁沒有變厚。RA組內(nèi)膜斑塊出現(xiàn)，表面多有不平整，內(nèi)皮細胞間不連續(xù)，有隆起及脫落出現(xiàn)，有脂質(zhì)沉著和梭形細胞增生。內(nèi)彈力板、平滑肌細胞、中膜和外膜沒有發(fā)現(xiàn)明顯異常。T組較RA組病變有所減輕，能夠觀察到不同水平的復原狀態(tài)。
　　7.免疫組化觀察并半定量分析各實驗組大鼠主動脈內(nèi)皮細胞Bcl-2/Bax的表達結(jié)果：Bcl-2、Bax主要在主動脈內(nèi)皮細胞的細胞漿中呈現(xiàn)，免疫組化表達呈棕黃色；RA組Bcl-2和Bcl-2/Bax

11、的表達明顯低于N組（*P<0.01），RA組Bax的表達明顯高于N 組（*P<0.01）；T組Bcl-2和Bcl-2/Bax的表達明顯高于RA組（#P<0.01），T組Bax的表達明顯低于RA組（#P<0.01）。8.TUNEL染色法觀察各實驗組大鼠主動脈內(nèi)皮細胞凋亡狀況及凋亡結(jié)果分析：各實驗組大鼠均有主動脈內(nèi)皮細胞的死亡的存在，RA組的凋亡指數(shù)要明顯大于N組（*P<0.01）；T組的凋亡指數(shù)明顯小于RA組（#P<0.01）。

12、
　　結(jié)論：
　　1.CIA大鼠存在血脂水平異常、血清PAPP-A增高、血清炎癥因子增高及主動脈內(nèi)皮損傷，即證明了其具備As形成的初期條件。
　　2.PAPP-A可能參與了CIA大鼠動脈內(nèi)皮的損傷，為其是否能作為預測早期動脈粥樣硬化的指標提供了有力證據(jù)。
　　3.單獨應用阿托伐他汀能在一定程度上改善類風濕關(guān)節(jié)炎造成的血脂水平紊亂、血清PAPP-A增高、血清炎癥因子增高及主動脈內(nèi)皮損傷。
　　4.阿托伐他汀治