1、隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，細胞制劑正在成為繼小分子藥物制劑和生物大分子制劑之后的下一代疾病治療試劑。紅細胞，作為人體內(nèi)的天然氧氣運輸載體，具有很多無與倫比的獨特性質(zhì)：超長的血液循環(huán)時間（人類紅細胞循環(huán)壽命達120天）；很好的膜穩(wěn)定性和變形性（可以通過比自己直徑小的毛細血管）；特殊的形狀，較高的比表面積；優(yōu)越的生物相容性（異體輸血技術(shù)已非常成熟而安全）。鑒于紅細胞所具有的這些獨特優(yōu)勢，利用紅細胞來治療疾病，解決其他手段所不能解決的問題，具有

2、深遠的科學(xué)及現(xiàn)實意義。本課題主要基于紅細胞開展了兩方面的工作。一方面，通過功能化改造紅細胞，我們構(gòu)建了一種可以攜帶藥物、靶向腫瘤、刺激響應(yīng)性釋放藥物的紅細胞；另外一方面，我們通過模擬抗原提呈細胞，對紅細胞表面進行了功能化設(shè)計，使其具有攜帶腫瘤特異性抗原、提供T細胞活化信號、刺激抗腫瘤免疫的能力。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴用一種兩親性高分子（二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素）（DSPE-PEG-Biotin）嵌入到紅細胞膜

3、中，然后通過親和素（Avidin），將生物素化的靶向多肽RGD（Arg-Gly-Asp）偶聯(lián)到紅細胞表面，我們得到了具有腫瘤血管靶向能力的紅細胞RBC-RGD。接著，利用低滲透析的方法，將抗腫瘤藥物阿霉素（Doxorubicin，DOX）和光熱轉(zhuǎn)化試劑吲哚菁綠-牛血清白蛋白復(fù)合物（Indocyanine Green-Bovine Serum Albumin，ICG-BSA）共同裝載到紅細胞內(nèi)部，我們得到了具有光熱響應(yīng)性藥物釋放能力的載藥

4、紅細胞 IB&D@RBC-RGD。通過聯(lián)合腫瘤靶向和可控釋放，IB&D@RBC-RGD就可以實現(xiàn)在腫瘤部位靶向富集，然后在近紅外激光的照射下將化療藥物釋放到腫瘤內(nèi)部。此外，利用IB&D@RBC-RGD的光熱效應(yīng)和藥物釋放，我們實現(xiàn)了光熱治療和化療的聯(lián)合，在細胞水平實現(xiàn)了良好的協(xié)同效果。⑵基于抗原提呈細胞（Antigen Presenting Cells，APCs）提呈抗原并激活T細胞的“三信號理論”，我們對紅細胞表面進行了功能化構(gòu)建：首

5、先，我們將 Biotin修飾到紅細胞膜上，然后通過鏈霉親和素（Streptavidin）將生物素化的CD28激活抗體（anti-CD28）和載有腫瘤抗原肽的主要組織相容性復(fù)合物-I（pMHC-I）修飾到紅細胞表面。接著，我們利用DSPE-PEG嵌入到紅細胞膜的方法，將IL-2偶聯(lián)到紅細胞上。這樣，我們就得到了一種可以提供 T細胞活化三信號的人造抗原提呈細胞（RBC-based artificial APCs，RBC-based aAPC