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![Shh和Gli-1在人腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)及其相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/056c0110-3f3d-4e11-b8d2-e45b551ef830/056c0110-3f3d-4e11-b8d2-e45b551ef8301.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討SHH(Sonic Hedgehog Signaling Pathway)信號(hào)通路起始因子Shh、核轉(zhuǎn)錄因子Gli-1在不同級(jí)別星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤及正常腦組織中表達(dá)及相關(guān)性。
方法:
1、收集2014年5月至2015年5月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)組織標(biāo)本:星形膠質(zhì)瘤組織50例(其中高級(jí)別膠質(zhì)瘤36例、低級(jí)別膠質(zhì)瘤14例)及正常腦組10例,經(jīng)甲醛固定。星形膠質(zhì)瘤標(biāo)本20例(高級(jí)別膠質(zhì)瘤、低級(jí)別膠質(zhì)瘤各10
2、例)、正常腦組織標(biāo)本8例,-80℃冰箱凍存(正常腦組織標(biāo)本來(lái)自神經(jīng)外科顱腦損傷患者,術(shù)前已告知患者家屬標(biāo)本用途并取得患者家屬同意)。
2、依據(jù)WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn),定義高級(jí)別膠質(zhì)瘤為WHO分級(jí)Ⅲ~Ⅳ級(jí),低級(jí)別膠質(zhì)瘤為Ⅰ~Ⅱ級(jí)。
3、應(yīng)用免疫組織化學(xué)(Immumohistochemistory)SP法檢測(cè)Shh及Gli-1在各組織中的表達(dá)情況。
4、應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)S
3、hh及Gli-1 mRNA在各組織中表達(dá)情況。
5、運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS21.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:
1、免疫組化結(jié)果表明:Shh陽(yáng)性信號(hào)定位于細(xì)胞胞膜、胞質(zhì);Gli-1陽(yáng)性信號(hào)定位于細(xì)胞胞質(zhì)、胞核。在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中Shh的陽(yáng)性表達(dá)率為61.1%(22/36),低級(jí)別膠質(zhì)瘤中Shh的陽(yáng)性表達(dá)率為57.1%(8/14),正常腦組織中 Shh的陽(yáng)性表達(dá)率為10%(1/10),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在高級(jí)
4、別膠質(zhì)瘤中Gli-1的陽(yáng)性表達(dá)率為69.4%(25/36),低級(jí)別膠質(zhì)瘤中Gli-1的陽(yáng)性表達(dá)率為28.6%(4/14),正常腦組織中Gli-1的陽(yáng)性表達(dá)率為10%(1/10),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中,兩兩對(duì)比,高級(jí)別膠質(zhì)瘤與低級(jí)別膠質(zhì)瘤中Shh的陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;高級(jí)別膠質(zhì)瘤與正常腦組織、低級(jí)別膠質(zhì)瘤與正常腦組織中Shh的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。高級(jí)別膠質(zhì)瘤與低級(jí)別膠質(zhì)瘤、高級(jí)別膠質(zhì)瘤與正常腦組織中Gli-1的陽(yáng)性率對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)
5、意義;低級(jí)別膠質(zhì)瘤與正常腦組織中Gli-1的陽(yáng)性率對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2、RT-PCR結(jié)果表明:在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中 Shh mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.126±0.020,低級(jí)別膠質(zhì)瘤中Shh mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.113±0.045,正常腦組織中Shh mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.061±0.039,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中Gli-1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.141±0.032,低級(jí)別膠質(zhì)瘤中 Gli-1 mRNA
6、的相對(duì)表達(dá)量為0.074±0.044,正常腦組織中Gli-1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.040±0.024,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中,兩兩對(duì)比,高級(jí)別膠質(zhì)瘤與低級(jí)別膠質(zhì)瘤間Shh mRNA相對(duì)表達(dá)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;高級(jí)別膠質(zhì)瘤與正常腦組織、低級(jí)別膠質(zhì)瘤與正常腦組織間Shh mRNA相對(duì)表達(dá)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。高級(jí)別膠質(zhì)瘤與低級(jí)別膠質(zhì)瘤、高級(jí)別膠質(zhì)瘤與正常腦組織間Gli-1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;低級(jí)別膠質(zhì)瘤與正常腦組織間相對(duì)表達(dá)量無(wú)
7、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3、Shh與Gli-1相關(guān)性統(tǒng)計(jì):在免疫組化中,Shh與Gli-1相關(guān)系數(shù)為:0.926(P<0.05);在PCR中,Shh與Gli-1相關(guān)系數(shù)為:0.588(P<0.05)。
結(jié)論:
1、Shh、Gli-1在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)顯著高于正常腦組織,提示SHH信號(hào)通路在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中是普遍激活的。
2、Shh與Gli-1的表達(dá)在免疫組化及PCR中均成線性相關(guān),提示Shh、Gli-1共同參與了
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