1、重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)是多種原因引起胰酶激活導(dǎo)致胰腺組織水腫、壞死和出血，以致全身臟器功能衰竭的炎癥性疾病。雖然內(nèi)鏡括約肌切開術(shù)治療膽結(jié)石患者，選擇性腸道凈化和預(yù)防性抗生素的使用可能對(duì)治療胰腺炎是有益的，但是一直沒有特效的治療藥物。腸道屏障功能在 SAP的恢復(fù)中發(fā)揮著重要的作用，所以研究影響腸道屏障的因素，減少SAP的腸道損傷，有助于SAP的治療。近年來姜黃素對(duì)SAP的作用越來越受到

2、大家的關(guān)注。
　　姜黃素是多酚類化合物，具有抗氧化性、抗炎癥反應(yīng)、抗病毒、抗腫瘤等作用。姜黃素可以引起生長(zhǎng)因子、蛋白激酶及轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的變化。聯(lián)苯二氟酮EF24是姜黃素的類似物，目前研究EF24主要圍繞在促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡及發(fā)現(xiàn)治療腫瘤的方法上，尚無EF24與急性胰腺炎及腸粘膜屏障方面的研究報(bào)道。Vivek R.Yadav等證明EF24能抑制失血性休克時(shí)的炎癥反應(yīng)，因而本研究從抗炎癥反應(yīng)的角度分析姜黃素類似物EF24對(duì)急性胰腺炎腸粘

3、膜屏障的作用。
　　目的：本實(shí)驗(yàn)旨在通過觀察SAP時(shí)胰腺、腸道組織學(xué)的變化，檢測(cè)腸道組織p65、Claudin-1蛋白和mRNA的表達(dá)情況和血清IL-6、TNF-α的濃度，探索聯(lián)苯二氟酮EF24對(duì)胰腺炎腸道損傷的作用及機(jī)制，為治療SAP腸道損傷提供新的思路。
　　方法：
　　1.將60只SD大鼠隨機(jī)分成空白對(duì)照組（CON）、重癥急性胰腺炎組（SAP）和聯(lián)苯二氟酮EF24組（EF24），每組再分為6h、12h2個(gè)亞組，每

4、組各10只大鼠。
　　2.SAP組、EF24組大鼠給予腹腔內(nèi)注射20％L-精氨酸3.0g/kg，間隔1h后，注射同等劑量的L-精氨酸；CON組大鼠給予腹腔內(nèi)注射與L-精氨酸同等劑量的0.9%NaCl，間隔1h后，再次注射同等劑量的NaCl；造模成功后1h，SAP組大鼠給予腹腔內(nèi)注射聯(lián)苯二氟酮 EF24（0.4mg/kg）；Con組、EF24組大鼠給予腹腔內(nèi)注射同等劑量的聚乙二醇400（聚乙二醇：0.9%NaCl=1:1）。

5、　　3.分別于造模后6h、12h留取胰腺組織、腸道組織和血液，檢測(cè)血清內(nèi)IL-6、TNF-α水平，留取組織標(biāo)本，通過HE染色觀察腸道、胰腺的組織學(xué)變化，采用RT-PCR、Western-blot的方法觀察比較三組腸道p65、Claudin-1蛋白及mRNA的表達(dá)差異。
　　4.所有數(shù)據(jù)采用(x±S)表示，應(yīng)用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理。設(shè)α=0.05，P<0.05為差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：

6、　　1.HE染色結(jié)果示：SAP組腸道和胰腺組織病理損傷程度隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸加重；EF24組比SAP組各時(shí)間點(diǎn)腸道與胰腺組織病變程度有所減輕。
　　2.血清TNF-α的水平： SAP組與CON組各時(shí)間點(diǎn)比較，大鼠血清TNF-α濃度顯著升高（P＜0.01）；EF24組與CON組各時(shí)間點(diǎn)比較，大鼠血清TNF-α水平明顯升高（P＜0.05）；EF24組與SAP組相比明顯下降（P＜0.05）；各組兩個(gè)亞組之間相比，CON組、EF24組6h、

7、12h兩個(gè)亞組無顯著差異（P＞0.05）,只有SAP組12h組顯著高于6h組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　3.血清IL-6水平：SAP組與CON組各時(shí)間點(diǎn)比較，大鼠血清IL-6水平顯著升高（P＜0.01）；EF24組與CON組各時(shí)間點(diǎn)比較，大鼠血清IL-6濃度明顯升高（P＜0.05）；EF24組與SAP組相比顯著下降（P＜0.05）；各組兩個(gè)亞組之間相比，三組6h、12h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)之間均無顯著差異（P＞0.05）。

8、>　　4.腸道組織Claudin-1 mRNA表達(dá)情況：SAP組腸道組織Claudin-1 mRNA的量較CON組明顯減少，具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；EF24組與CON組各時(shí)間點(diǎn)比較，腸道組織Claudin-1 mRNA表達(dá)量顯著減少（P＜0.05）；EF24組與SAP組比較Claudin-1 mRNA的量明顯上升，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；CON組、EF24組Claudin-1 mRNA量6h、12h時(shí)間點(diǎn)相比無顯

9、著差異（P＞0.05），SAP組兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)相比，6h mRNA的量明顯高于12h，且有顯著差異（P＜0.01）。
　　5.腸道組織p65 mRNA表達(dá)情況：SAP組和EF24組p65 mRNA的量較CON組均上升（分別P＜0.01；P＜0.05）；EF24組與SAP組相比p65 mRNA的量明顯下降，有顯著差異（P＜0.05）；CON組、EF24組p65 mRNA量6h、12h時(shí)間點(diǎn)相比無顯著差異（P＞0.05），SAP組6h、1

10、2h時(shí)間點(diǎn)相比，12h mRNA的量明顯高于6h，且有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。
　　6.腸道組織Claudin-1蛋白表達(dá)情況：SAP組與CON組各時(shí)間點(diǎn)Claudin-1蛋白量相比均顯著降低(P<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；EF24組與CON組比較Claudin-1蛋白量明顯下降，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；EF24組與SAP組相比顯著上升（P<0.05）；SAP組兩個(gè)亞組相比，6h蛋白的量明顯高于12h，且有統(tǒng)

11、計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。
　　7.腸道組織p65蛋白表達(dá)情況：SAP組與CON組各時(shí)間點(diǎn)p65蛋白量相比均顯著升高(P<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；EF24組與CON組比較p65蛋白量明顯升高，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；EF24組與SAP組相比顯著下降（P<0.05）；SAP組兩個(gè)亞組相比，12h蛋白的量明顯高于6h，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）；EF24組6h、12h組比較，6h蛋白的量高于12h(P<0.05），