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文檔簡介
1、背景與目的:肝細胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是原發(fā)性肝癌中最常見的病理類型,其發(fā)病率有日益增長的趨勢。腫瘤干細胞(cancer stem cells,CSCs)學(xué)說認為,在腫瘤組織中存在一小群具有干細胞特性的腫瘤細胞,稱為CSCs,它與腫瘤的增殖、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和對放化療不敏感密切相關(guān)。而越來越多的研究結(jié)果表明,在腫瘤中能檢測到CSCs的存在。本研究從HCC組織樣本中分離CD133+細胞,并對其是否具
2、有CSCs樣特性進行研究。
方法:將25例手術(shù)獲得的新鮮HCC組織和對應(yīng)癌旁肝組織采用酶消化法分別消化成單個肝癌細胞和單個肝細胞,利用流式細胞術(shù)檢測部分單個肝癌細胞和單個肝細胞CD133的表達率。另外,用剩余的肝癌細胞進行原代培養(yǎng),用流式細胞術(shù)將培養(yǎng)獲得的肝癌細胞分選為CD133+和CD133-細胞,然后通過平板克隆形成實驗、腫瘤球形成實驗和裸鼠移植瘤形成實驗對比分析這兩組細胞的CSCs樣特性。
結(jié)果:通過酶消化法,
3、我們成功地培養(yǎng)出可傳代的肝癌細胞。25例HCC組織中CD133的表達率為3.8%~8.3%,平均值為(5.8±1.6)%,而癌旁肝組織CD133的表達率為0.1%~0.4%,平均值為(0.2±0.1)%,兩者相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=17.12,P<0.001)。分選獲得的CD133+和CD133-細胞的平均克隆率分別為(25.2±0.8)%和(7.6±0.8)%,兩者相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=81.95,P<0.001)。分選獲得的C
4、D133+和CD133-細胞的平均成球率分別為(20.3±0.6)%和(12.5±1.4)%,兩者相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=68.17,P<0.001)。取5例高表達CD133者進行裸鼠移植瘤形成實驗,結(jié)果表明CD133+細胞的裸鼠移植瘤形成能力明顯高于CD133-細胞。
結(jié)論:1、從HCC組織樣本中分離獲得的CD133+細胞只占HCC組織的一小部分。
2、從HCC組織樣本中分離獲得的CD133+細胞具有明顯的CSC
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