1、目的：
　　本研究旨在觀察超短波聯(lián)合硫酸軟骨素酶ABC(Chondritinase ABC，ChABC)治療對(duì)脊髓損傷后大鼠雙下肢神經(jīng)功能恢復(fù)的影響，以及對(duì)脊髓損傷后與膠質(zhì)瘢痕形成有關(guān)的因子:膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）、硫酸軟骨素蛋白聚糖(chondroitin sulphate proteoglycans，CSPGs)的影響，并觀察其能否進(jìn)一步抑制膠質(zhì)瘢痕形成及促

2、進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。
　　方法：
　　42只8周齡SD大鼠隨機(jī)分成2w及4w，共2個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn);每個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)又分3組，每組7只。3個(gè)組分別是:(1)對(duì)照組:每個(gè)時(shí)間點(diǎn)包括4只單純損傷組和3只損傷后注射PBS溶液組（該組大鼠術(shù)后立即經(jīng)微導(dǎo)管注入PBS6μL，以后每天用同樣劑量給藥1次，1周后停藥，拔出微導(dǎo)管）。(2)ChABC治療組:每個(gè)時(shí)間段7只。術(shù)后立即通過微導(dǎo)管注入1U/mL ChABC6μL，以后每天用同樣劑量給藥1次，

3、1周后停藥，拔出微導(dǎo)管。(3)ChABC聯(lián)合超短波治療組:每個(gè)時(shí)間點(diǎn)7只，術(shù)后第二天開始予小劑量超短波治療;每天1次，每次7分鐘，直至取材前一天。ChABC的給藥方式、每次給藥劑量均與ChABC治療組相同。制備大鼠脊髓損傷模型后1d及1w、2w、3w、4w做BBB神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分。術(shù)后2w、4w對(duì)相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的大鼠取出損傷區(qū)脊髓，儲(chǔ)存標(biāo)本，做病理切片。應(yīng)用免疫組織化學(xué)SABC法染色對(duì)GFAP、CSPGs兩個(gè)指標(biāo)進(jìn)行免疫組化染色。標(biāo)本封片后，

4、用裝有圖像采集軟件NIS-Elements F3.0的設(shè)備采集圖像，每個(gè)標(biāo)本采集5張。用NIS-Elements Br3.0軟件對(duì)所有采集的圖像檢測術(shù)后2w、4w脊髓組織中GFAP、CSPGs表達(dá)的平均光密度值差異。將每個(gè)標(biāo)本測得的5個(gè)平均光密度值取算數(shù)平均值，再將數(shù)據(jù)儲(chǔ)存到表格中，用于統(tǒng)計(jì)分析。行為學(xué)評(píng)分結(jié)果和GFAP、CSPGs的平均光密度值結(jié)果用統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，結(jié)果以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　神經(jīng)

5、行為學(xué)評(píng)分:術(shù)后1w到4w，各組大鼠的神經(jīng)功能均有提高。聯(lián)合治療組在各時(shí)間點(diǎn)的BBB評(píng)分均高于對(duì)照組，在2w和4w時(shí)，差異非常顯著(P＜0.001)，而ChABC治療組僅在術(shù)后第4w高于對(duì)照組，差異顯著（P＜0.01）;其他各時(shí)間點(diǎn)，雖然數(shù)值增高但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與ChABC治療組相比，聯(lián)合超短波治療組數(shù)值在各時(shí)間點(diǎn)雖有增高，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。GFAP、CSPGs免疫組化分析:與對(duì)照組相比，術(shù)后2

6、w時(shí)，ChABC治療組和聯(lián)合超短波治療組的CSPGs平均光密度值均明顯降低(P＜0.01)。術(shù)后4w時(shí)，對(duì)照組CSPGs表達(dá)也顯著降低，達(dá)到了ChABC治療組和聯(lián)合超短波治療組的水平。術(shù)后2w時(shí)，ChABC治療組和聯(lián)合超短波治療組的GFAP平均光密度值均比對(duì)照組明顯降低(P＜0.01);而對(duì)照組GFAP表達(dá)相對(duì)2w時(shí)確有升高，ChABC治療組和聯(lián)合超短波治療組仍保持在術(shù)后2w時(shí)水平，但與對(duì)照組相比，因平均光密度值結(jié)果差異較大，而且樣本量

7、不足，差異均無顯著性（P＞0.05）。聯(lián)合治療組和ChABC治療組在術(shù)后2個(gè)時(shí)間點(diǎn)上的GFAP、CSPGs平均光密度值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　用ChABC治療能明顯有促進(jìn)SCI后大鼠雙下肢的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)。在膠質(zhì)瘢痕形成早期，用ChABC治療能明顯抑制膠質(zhì)瘢痕形成相關(guān)的重要因子GFAP和CSPGs。用超短波聯(lián)合治療雖然在抑制GFAP、CSPGs和雙下肢的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)上較單純用ChABC治療有更好的