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文檔簡介
1、目的:通過建立兔顱骨的改良型富血小板纖維蛋白(Advanced-Platelet-rich fibrin,A-PRF)骨誘導模型,觀察A-PRF成骨效果,探討A-PRF誘導骨再生過程中誘導新生骨的微觀結構和組織學特點,評價A-PRF修復骨缺損的特點,為A-PRF在誘導骨再生及頜骨重建的臨床應用提供實驗參考。
方法:標準實驗動物日本大耳兔30只隨機分為A-PRF組和空白組各15只,在兔顱骨骨中縫兩側均制造一個6.0 mm的全層洞
2、穿性骨缺損,A-PRF組植入A-PRF膜,空白組不填入任何材料,術后當日、2周、4周、8周、12周術區(qū)行大體觀察后分別處死實驗動物,取下術區(qū)骨標本行X線檢查、Micro-CT分析、HE染色、Masson染色、免疫組織化學分析。
結果:30只實驗動物手術順利完成,愈合良好,成功建立兔顱骨的A-PRF骨誘導模型,術區(qū)觀察見A-PRF組A-PRF膜隨著新生骨的增加而逐漸減少,A-PRF膜術后8周后消失,新生骨術后4周后形成明顯,術后
3、8周后逐漸成熟與周圍骨同。空白組骨缺損區(qū)邊界清楚,隨著時間的延長,軟組織逐漸長入骨缺損區(qū),至術后12周,未見明顯新骨形成。
X線觀察可見:術后當日骨缺損明顯,隨著時間的延長,A-PRF組的骨缺損邊緣逐漸模糊,呈現(xiàn)白色高密度影,且呈向心性生長態(tài)勢??瞻捉M至術后8周骨缺損邊緣霧化,術后12周骨缺損邊緣見少量白色高密度影。
Micro-CT測量分析:A-PRF組術后當日骨缺損內(nèi)未見骨小梁生成,術后2周邊緣見少量新骨形成,隨
4、著時間的延長,骨小梁逐漸清晰可見且排列規(guī)律,術后12周時與周圍正常骨小梁接近??瞻捉M術后12周時仍然清晰可見骨缺損區(qū),呈低密度影像,骨小梁極少。統(tǒng)計分析BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp參數(shù)可得出同一時間節(jié)點實驗組與空白組的差異有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
HE染色:A-PRF組術后當日骨缺損區(qū)見大量紅細胞,白細胞,血小板等結構,術后2周,骨缺損區(qū)見一種接近骨組織的物質(zhì)形成,術后4周骨缺損區(qū)見新生的骨小梁,術后8周
5、、12周骨缺損區(qū)見少量新生骨組織中形成骨髓腔和骨髓??瞻捉M:術后當日骨組織見未見任何物質(zhì)。術后2周見少量纖維結蹄組織長入,術后4周纖維結蹄組織增多,仍未見新骨形成,術后8周見少量骨細胞游離期間,未見新骨形成,術后12周見少量新骨形成,骨小梁細小,未見骨髓腔和骨髓。
Masson染色:A-PRF組和空白組均成紅-藍相間,A-PRF組在術后各時間節(jié)點較空白組紅染區(qū)域更多,更廣。
免疫組織化學分析:RANKL、OPG免疫組
6、織化學平均光密度分析結果顯示:A-PRF組RANKL表達術后當日至術后2周釋放較平穩(wěn),術后2周后逐漸增多,至術后12周時仍成上升趨勢,同一時間節(jié)點與空白組比較有統(tǒng)計學差異(P<0.05),OPG表達在術后當日釋放逐漸增多,8周達到高峰后逐漸下降,同一時間節(jié)點與空白組比較有統(tǒng)計學差異(P<0.05)??瞻捉MRANKL、OPG表達均在術后8周后表達增多,至觀察期結束,表達仍成上升趨勢。
結論:1.本實驗通過制備兔顱骨的臨界性骨缺損
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