1、目的:
　　黃連丸由黃連和生地兩味中藥組成，具有降低血糖的功效，中醫(yī)常用于糖尿病的臨床治療。本課題通過建立黃連丸提取物中生物堿類和環(huán)烯醚萜類成分的指紋圖譜、黃連丸提取物中主要生物堿類和環(huán)烯醚萜類成分的含量測定方法以及黃連丸提取物中有效成分在大鼠血漿中的含量測定方法，以藥代動(dòng)力學(xué)方法為基礎(chǔ)進(jìn)一步研究黃連丸治療2型糖尿病的配伍，為黃連丸治療2型糖尿病的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　(1)建立黃連丸提取物中生物堿類

2、成分的HPLC指紋圖譜并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。
　　(2)建立黃連丸提取物中環(huán)烯醚萜類成分的HPLC指紋圖譜并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。
　　(3)建立同時(shí)測定黃連丸提取物中4種生物堿含量的HPLC方法并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。
　　(4)建立測定黃連丸提取物中梓醇含量的HPLC方法并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。
　　(5)建立同時(shí)測定大鼠血漿中4種生物堿含量的LC-MS法并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證
　　(6)通過高脂飲食喂養(yǎng)聯(lián)合鏈脲佐菌素腹腔注射誘導(dǎo)

3、建立2型糖尿病大鼠模型。
　　(7)將2型糖尿病大鼠分為黃連丸提取物組(QF)和黃連提取物組(HL)，分別灌胃黃連丸提取物（1∶1組）和黃連提取物，然后按時(shí)間點(diǎn)采集血樣，用建立的LC-MS法分別測定兩組大鼠血漿樣品中各生物堿類成分的濃度，并將血藥濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，得到相關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果:
　　(1)確定了黃連丸提取物中生物堿類成分的HPLC指紋圖譜的色譜條件，且方法學(xué)考察結(jié)果良好。
　　(2)確定了黃

4、連丸提取物中環(huán)烯醚萜類成分的HPLC指紋圖譜的色譜條件，且方法學(xué)考察結(jié)果良好。
　　(3)確定了同時(shí)測定黃連丸提取物中4種生物堿含量的HPLC法的色譜條件，且方法學(xué)考察結(jié)果良好。小檗堿、黃連堿、藥根堿和鹽酸巴馬亭在黃連提取物中的含量分別為231.93、39.99、27.95和47.32 mg/g;在黃連丸提取物（1∶1組）中分別為56.55、8.37、5.01和11.7 mg/g;在黃連丸提取物（1∶4組）中分別為33.03、4.

5、95、3.13和6.40 mg/g。
　　(4)確定了測定黃連丸提取物中梓醇含量的HPLC法的色譜條件，且方法學(xué)考察結(jié)果良好。梓醇在生地提取物中的含量為2.2 mg/g;在黃連丸提取物（1∶1組）中為2.1 mg/g;在黃連丸提取物（1∶4組）中為1.4 mg/g。
　　(5)確定了同時(shí)測定大鼠血漿中4種生物堿含量的LC-MS法的色譜與質(zhì)譜條件，且方法學(xué)考察結(jié)果良好。
　　(6)成功建立了2型糖尿病大鼠模型，成模率為7

6、3％。
　　(7) QF組中小檗堿和黃連堿的AUC0-24h均顯著高于HL組，而兩組之間藥根堿和鹽酸巴馬亭的AUC0-24h均無明顯差別;QF組中小檗堿和黃連堿的Cmax均顯著高于HL組;QF組中黃連堿的Tmax顯著低于HL組;QF組中鹽酸巴馬亭的Cmax高于HL組;兩組之間四種生物堿成分的MRT均無顯著差異。
　　結(jié)論:
　　(1)由黃連丸提取物中生物堿類成分的HPLC指紋圖譜可知，黃連及黃連丸提取物中均檢測到了藥根

7、堿、黃連堿、鹽酸巴馬亭和小檗堿等主要生物堿成分，說明黃連與生地配伍后，并沒有發(fā)生這類主成分的丟失。并且藥根堿、黃連堿、鹽酸巴馬亭和小檗堿可以作為黃連丸提取物指紋圖譜的特征峰。
　　(2)由黃連丸提取物中環(huán)烯醚萜類成分的HPLC指紋圖譜可知，黃連及黃連丸提取物中均檢測到了梓醇，說明黃連與生地配伍后，并沒有發(fā)生環(huán)烯醚萜類主成分的丟失。并且梓醇可以作為黃連丸提取物指紋圖譜的特征峰。
　　(3)本課題建立的同時(shí)測定黃連丸提取物中4種

8、生物堿含量的HPLC法準(zhǔn)確可靠。
　　(4)本課題建立的測定黃連丸提取物中梓醇含量的HPLC法準(zhǔn)確可靠。
　　(5)本課題建立的同時(shí)測定大鼠血漿中4種生物堿含量的LC-MS法準(zhǔn)確可靠。
　　(6)同黃連單方相比，黃連與生地配伍對生物堿類成分在2型糖尿病大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)產(chǎn)生了顯著的影響，尤其是提高了小檗堿和黃連堿的吸收，而在藥理學(xué)中，以小檗堿為主的生物堿類成分正是治療2型糖尿病的有效成分，其吸收增加會(huì)使得療效增強(qiáng)，從