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文檔簡介
1、目的:
應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)檢測腹膜透析相關(guān)性腹膜炎(peritoneal dialysis related peritonitis,PDRP)患者腹透液致病菌分布,與傳統(tǒng)培養(yǎng)結(jié)果比較,旨在探討PCR在PDRP細菌檢測中的臨床應(yīng)用價值。
對象與方法:
1.收集2014年1月至12月入住安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院的40例PDRP患者腹透液,分為兩份,一份
2、行傳統(tǒng)細菌培養(yǎng)及藥敏試驗,另一份置于80℃保存,用于后續(xù)PCR檢測。
2.依據(jù)文獻報道并參考同期傳統(tǒng)細菌培養(yǎng)結(jié)果,確立17種實驗菌。
3.根據(jù)細菌16SrRNA基因設(shè)計細菌通用引物,并參考文獻設(shè)計17種實驗菌的特異引物,提取標本DNA后進行實時熒光PCR(Real-time Polymerase Chain Reaction,qPCR)擴增。標準菌株DNA提取液為陽性對照,無菌雙蒸水為陰性對照。
4.將PC
3、R結(jié)果與常規(guī)培養(yǎng)結(jié)果進行比較,用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行臨床資料數(shù)據(jù)分析。
結(jié)果:
1.傳統(tǒng)細菌培養(yǎng)結(jié)果顯示:40例標本陽性率為65.00%(26/40),以G+球菌為主,占69.23%(18/26),主要菌種為:表皮葡萄球菌(13.89%)、溶血葡萄球菌(11.11%)、大腸桿菌(11.11%)、金黃色葡萄球菌(8.33%)。
2.患者的一般資料顯示,培養(yǎng)陽性組入院時腹透液白細胞計數(shù)及CRP值明顯高于
4、陰性組(P<0.05),幾乎全部患者均有腹痛、腹透液渾濁、壓痛反跳痛等臨床癥狀和體征,陽性組中6例有既往感染史,陰性組為3例,兩組其余各指標間無統(tǒng)計學差異。
3.PCR結(jié)果顯示:40例標本總陽性率為82.50%(33/40),除2例未測出具體菌種外,余主要菌種與普通培養(yǎng)結(jié)果無異。4.以細菌培養(yǎng)作為金標準,PCR技術(shù)對 PDRP致病菌檢測的敏感性為96.15%,特異性為42.86%,且檢出陽性率明顯高于普通培養(yǎng)法,二者具有統(tǒng)計學
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