1、目的:
　　通過鋼絲結扎大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙配合高糖高黏飲食建立實驗性牙周炎動物模型，槲皮素灌胃治療6周，治療前后牙周組織形態(tài)學變化及大鼠牙周組織中環(huán)氧化酶-2(COX-2)及金屬基質(zhì)蛋白酶-8(MMP-8)表達的變化。探討槲皮素對大鼠實驗性牙周炎的治療作用，為槲皮素治療牙周炎的臨床應用提供理論依據(jù)和實驗參考。
　　方法:
　　選取50只6月齡健康雌性SD大鼠，體重300g左右。自由攝食、水，適應性喂養(yǎng)1周。隨機抽取1

2、0只，記為正常對照組(Normal group，Ngroup)，正常喂養(yǎng)，不做處理;6周后10％水合氯醛腹腔注射麻醉，股動脈放血處死，取上頜骨標本;其余40只分別給予10％水合氯醛麻醉，直徑0.20mm的結扎絲結扎大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙牙頸部，每天高糖高黏食物喂養(yǎng)，6周后隨機抽取10只處死，10％水合氯醛腹腔注射麻醉下處死，取上頜骨標本，鑒定牙周炎成模，同時作為牙周結扎組(Ligation group，group L);其余30只再隨機分

3、為3組，每組10只，分別為:去結扎絲組(Removal Ligation group，group R):10％水合氯醛腹腔注射麻醉，去除結扎絲，正常喂養(yǎng)6周后處死，取上頜骨標本;去結扎絲+槲皮素灌胃組(Removal ligation+ Quercetin group，group RQ):10％水合氯醛腹腔注射麻醉，去除結扎絲;從第7周開始給予每只大鼠槲皮素灌胃100mg/(kg.d)，6周后處死，取上頜骨標本;結扎+槲皮素灌胃組(Wi

4、th ligation+ Quercetingroup，group WQ):從第7周開始給予每只大鼠槲皮素灌胃100mg/(kg.d)，6周后處死，取上頜骨標本，均置于10％甲醛溶液中固定48小時，然后經(jīng)10％EDTA溶液脫鈣8周，制作牙體牙周組織連續(xù)切片，HE染色光鏡下觀察牙周組織的形態(tài)學變化，免疫組織化學染色法觀察各組牙周組織中COX-2、MMP-8的表達變化，作統(tǒng)計學分析處理。
　　結果:
　　1肉眼觀察
　　正

5、常組（N):牙齦乳頭形態(tài)基本完整，無紅腫，探診無出血，未探及牙周袋;
　　牙周結扎組(L):牙齦紅腫，與牙面分離，有食物殘渣堆積，可探及深牙周袋，個別大鼠牙周袋內(nèi)有膿性滲出物分泌，探診出血;
　　去結扎絲組(R):牙齦無紅腫，探診無出血，牙齦乳頭形態(tài)基本完整;
　　去結扎絲+槲皮素灌胃組(RQ）:牙齦無紅腫，探診無出血，牙齦乳頭形態(tài)基本完整，與正常組無明顯區(qū)別;
　　不去結扎絲+槲皮素灌胃組(WQ):牙齦無紅腫，

6、探診無出血，與牙周結扎組相比，牙周袋較淺。
　　2病理學觀察
　　正常組（N):結合上皮位于釉牙骨質(zhì)界處，無炎癥細胞浸潤，牙周膜纖維排列有序，牙槽嵴頂未見明顯吸收。
　　牙周結扎組(L）:結合上皮離開釉牙骨質(zhì)界，向根方移位形成深牙周袋，周圍有大量炎性細胞浸潤，牙周膜間隙增寬，牙周膜纖維排列紊亂，周圍毛細血管擴張充血，牙槽骨出現(xiàn)活躍的破骨細胞性骨吸收陷窩，牙槽嵴頂及固有牙槽骨吸收破壞;
　　去結扎絲組(R):牙周袋

7、位于釉牙骨質(zhì)界處，牙周袋與牙槽骨之間可見粗大的膠原纖維束增生，其間可見少量慢性炎癥細胞浸潤;牙槽骨內(nèi)可見原有的骨吸收陷窩區(qū)有新的類骨質(zhì)形成。
　　去結扎絲+槲皮素灌胃組(RQ):結合上皮位于釉牙骨質(zhì)界處，牙周袋袋壁上皮及結合上皮周圍幾乎見不到炎癥細胞，牙槽骨內(nèi)可見少量骨吸收陷窩及破骨細胞，較多的成骨細胞，可見新生骨，牙槽嵴頂可見成骨細胞;
　　不去結扎絲+槲皮素灌胃組(WQ):牙周袋變淺，溝內(nèi)和袋壁上皮及結合上皮周圍有少量炎

8、性細胞浸潤，牙周袋與牙槽骨之間可見大量新生的纖維結締組織，其間可見新生的毛細血管;牙槽嵴頂可見有新生骨形成;
　　3牙周組織中COX-2及MMP-8的分布及表達
　　3.1 COX-2在牙周組織中的表達
　　COX-2在牙周組織中主要表達在有大量炎癥細胞聚集的浸潤區(qū)，鱗狀上皮、固有層血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞中，陽性染色為棕黃色或黃色顆粒。各組平均光密度值分別為:正常組(N):0.149±0.0042，牙周結扎組(L):

9、0.181±0.0050，去結扎絲組(R):0.165±0.0040，去結扎絲+槲皮素灌胃組(RQ):0.152±0.0021，不去結扎絲+槲皮素灌胃組(WQ):0.162±0.0039。統(tǒng)計分析比較如下:
　　3.1.1牙周結扎組(L):COX-2表達呈強陽性(+++)，與正常組(N)相比(P＜0.05)差異有統(tǒng)計學意義;
　　3.1.2去結扎絲組(R): COX-2表達呈陽性(++)或弱陽性(+)，與正常組(N)相比(P

10、＜0.05);與牙周結扎組(L)相比(P＜0.05），差異有統(tǒng)計學意義;
　　3.1.3去結扎絲+槲皮素灌胃組(RQ): COX-2表達呈弱陽性(+)或陰性(-)，與正常組(N)相比(P＞0.05)，差異無統(tǒng)計學意義;與去結扎絲組(R)相比(P＜0.05)差異有統(tǒng)計學意義;
　　3.1.4不去結扎絲+槲皮素灌胃組(WQ): COX-2表達呈弱陽性(+)，與牙周結扎組(L)相比(P＜0.05），與去結扎絲+槲皮素灌胃組相比（P

11、＜0.05），差異有統(tǒng)計學意義。
　　3.2 MMP-8在牙周組織中的表達
　　MMP-8在牙周組織中主要表達在有大量炎癥細胞聚集的浸潤區(qū)、成纖維細胞、破骨細胞等細胞中。陽性染色為棕黃色或黃色顆粒，各組平均光密度值分別為:正常組(N):0.154±0.0032，牙周結扎組(L):0.203±0.0057，去結扎絲組(R):0.169±0.0022，去結扎絲+槲皮素灌胃組(RQ):0.158±0.0022，不去結扎絲+槲皮素灌

12、胃組(WQ):0.162±0.0046。統(tǒng)計分析結果比較如下:
　　3.2.1牙周結扎組(L): MMP-8表達呈強陽性（+++），與正常組(N)相比(P＜0.05)差異有統(tǒng)計學意義;
　　3.2.2去結扎絲組(R): MMP-8表達呈陽性(++)或弱陽性(+)，與正常組(N)相比(P＜0.05);與牙周結扎組(L)相比(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學意義;
　　3.2.3去結扎絲+槲皮素灌胃組(RQ）:MMP-8表達呈

13、弱陽性(+)，與正常組(N)相比(P＞0.05），差異無統(tǒng)計學意義;與去結扎絲組(R)相比(P＜0.05）差異有統(tǒng)計學意義;
　　3.2.4不去結扎絲+槲皮素灌胃組(WQ): MMP-8表達呈弱陽性(+)，與牙周結扎組(L)相比(P＜0.05)，與去結扎絲+槲皮素灌胃組(RQ)相比(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計學意義。
　　結論:
　　1鋼絲結扎大鼠第一磨牙配合高糖高黏飲食成功建立大鼠實驗性牙周炎模型;
　　2單純