1、肺是重癥休克后最易受累和最先出現(xiàn)癥狀的靶器官，失控的全身炎癥反應(yīng)是引起急性肺損傷（acute lung injury，ALI）的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。眾多研究發(fā)現(xiàn)，失血性休克后的腸淋巴液回流是引起ALI的重要機(jī)制之一，其作用機(jī)制與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。炎癥小體（inflammasome）是胞漿內(nèi)由多蛋白組成的復(fù)合體，是炎癥反應(yīng)的核心;NLRP(Nod-likereceptor family，pyrin domain containing)3炎癥小體能被

2、各種類(lèi)型的分子、細(xì)菌或病毒所激活，在炎癥、代謝等多種疾病的發(fā)展中發(fā)揮重要作用，是目前研究最多的一種炎癥小體，在多種原因?qū)е翧LI的發(fā)病過(guò)程中均具有重要作用;最近研究表明，NLRP3炎癥小體活化也是重癥失血性休克引起ALI的重要機(jī)制之一。但是，休克腸淋巴液介導(dǎo)ALI的過(guò)程是否與NLRP3炎癥小體的活化有關(guān)？減少休克腸淋巴液回流在減輕ALI的同時(shí)，是否可降低肺組織NLRP3炎癥小體的表達(dá)？均有待深入研究。
　　為此，本研究在已證實(shí)腸淋

3、巴液引流減輕失血性休克引起的ALI的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步采用失血性休克小鼠模型，觀察腸淋巴液引流對(duì)失血性休克小鼠肺組織NLRP3炎癥小體及相關(guān)信號(hào)分子表達(dá)的影響，檢測(cè)休克腸淋巴液是否含有高濃度的NLRP3及炎癥介質(zhì)，并進(jìn)一步觀察靜脈輸入休克腸淋巴液是否可引起正常小鼠肺組織NLRP3炎癥小體的高表達(dá)，從而驗(yàn)證NLRP3炎癥小體在休克腸淋巴液介導(dǎo)ALI中的作用。
　　首先，18只雄性C57BL/6J小鼠隨機(jī)均分為:假手術(shù)組(Sham)、休克

4、組(Shock)、休克+引流組(Shock+drainage)。腹腔注射戊巴比妥鈉全身麻醉后，行雙側(cè)股部手術(shù)，右股動(dòng)脈插管連接生物信號(hào)采集系統(tǒng)，連續(xù)監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈血壓，左股側(cè)動(dòng)脈插管用于放血與液體復(fù)蘇;腹部手術(shù)，剝離腸淋巴管，用于腸淋巴液引流。待所有手術(shù)完成、穩(wěn)定30 min后，休克組、休克+引流組小鼠常規(guī)方法復(fù)制失血性休克模型。維持低血壓90 min后，將放出的全血與林格氏液按1∶1混勻，經(jīng)右側(cè)股動(dòng)脈輸液復(fù)蘇，30 min完成;休克+引

5、流組小鼠在復(fù)蘇結(jié)束后，行腸淋巴液引流，至輸液結(jié)束后3h。假手術(shù)組進(jìn)行相同的手術(shù)操作，但不放血、不輸液。各組小鼠在相當(dāng)于輸液結(jié)束后3h這一時(shí)間點(diǎn)，留取肺組織，觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化，檢測(cè)NLRP3、TLR2、TLR4、MyD88、白介素(interleukin，IL)-1β、IL-18的表達(dá)或含量。組織形態(tài)學(xué)觀察表明，假手術(shù)組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)基本正常，休克組小鼠肺組織出現(xiàn)了炎細(xì)胞增生、肺小葉間隔增厚等表現(xiàn)，休克+引流組小鼠肺組織損傷較輕。We

6、stern blotting檢測(cè)顯示，休克組小鼠肺組織NLRP3、TLR2、TLR4、MyD88的蛋白表達(dá)均顯著高于假手術(shù)組，腸淋巴液引流降低了休克小鼠肺組織NLRP3、TLR2、MyD88的蛋白表達(dá);ELISA檢測(cè)顯示，失血性休克后小鼠肺組織IL-1(…)、IL-18水平顯著增加，腸淋巴液引流降低了IL-1(…)、IL-18的含量;qRT-PCR檢測(cè)顯示，失血性休克引起了肺組織NLRP3、TLR2、TLR4、MyD88 mRNA表達(dá)，

7、腸淋巴液引流顯著降低了這些指標(biāo)的水平。
　　隨后，取正常野生型小鼠，部分小鼠在麻醉狀態(tài)下，腹部手術(shù)后引流正常淋巴液1h;部分小鼠按前述方法建立失血性休克模型、液體復(fù)蘇后引流休克腸淋巴液至3h。應(yīng)用Western blotting技術(shù)檢測(cè)淋巴液中NLRP3表達(dá)，應(yīng)用ELISA技術(shù)檢測(cè)IL-1(…)、IL-18含量。研究結(jié)果顯示，休克腸淋巴液中NLRP3表達(dá)、IL-1(…)、IL-18含量未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　上述研究表明，休克