1、桑葉始載于《神農本草經》，為?？浦参锷orus alba L.的干燥葉，藥用歷史悠久；性寒、味甘苦，歸肺、肝經，具有疏散風熱、清肺潤燥、清肝明目之功效，常用于風熱感冒，肺熱燥咳，頭暈頭痛，目赤昏花等。桑葉采收具有經霜采收的特殊要求，但現(xiàn)有的研究結果對于桑葉經霜采收的合理性與科學性尚不能科學闡釋，桑葉經霜采收的科學內涵值得深入研究。本論文結合植物代謝組學技術，通過高效液相色譜法和紫外分光光度法對桑葉經霜前后主要次生代謝產物含量的動態(tài)變化

2、及黃酮類成分合成途徑中2個關鍵酶活性變化規(guī)律進行了分析，并研究了經霜前后酶活性的變化與氣候溫度和黃酮類成分積累量之間的相關性，以期為進一步闡明經霜對桑葉黃酮類活性成分影響的機制及中藥桑葉經霜采收的合理性提供一定的理論依據。主要研究內容及結論如下：
　　1、桑葉經霜前后次生代謝產物含量動態(tài)變化研究采用高效液相色譜-質譜法（HPLC-MS）對桑葉黃酮類成分進行定性分析，并建立高效液相色譜法（HPLC）同時分析蘆丁、異槲皮苷、紫云英苷、

3、綠原酸4個成分的含量，采用紫外分光光度法測定桑葉總黃酮含量及柱前衍生化-高效液相色譜熒光檢測法測定桑葉1-脫氧野尻霉素（1-Deoxynojirimycin，DNJ）含量，研究了不同季節(jié)及經霜前后桑葉中4個黃酮單體成分、總黃酮及生物堿（DNJ）動態(tài)變化規(guī)律。結果表明，桑葉總黃酮積累量在8月份最低，經霜后11月積累量達到最高值；4個黃酮單體成分在7、8月份氣溫較高時含量較低，10、11月份經霜后達最大值；DNJ在7、8月份氣溫較高時含量最

4、高，9、10月份隨著氣溫下降含量下降，經霜后更低。平均氣侯溫度與次生代謝產物含量間的相關性分析結果顯示，溫度與黃酮類成分含量呈顯著負相關，與DNJ含量呈顯著正相關。
　　2、桑葉經霜前后苯丙氨酸解氨酶活性研究優(yōu)化桑葉生合成途徑參與黃酮類物質合成的第1個關鍵酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）的活性測定條件，結果表明，桑葉PAL活性最佳測定條件為pH8.8(0.05 mol/L)的硼砂-鹽酸緩沖液、加入0.2 g聚乙烯吡咯烷酮（PVP），底物

5、L-苯丙氨酸濃度為0.04 mol/L、40℃水浴反應40 min。分析桑葉經霜前后PAL活性動態(tài)變化規(guī)律，結果顯示，桑葉PAL活性在4-5月份較高，之后隨氣溫升高有所下降，到8月份達到最低，9月份后隨氣溫下降PAL活性逐漸上升。當霜降（10月23日）后桑葉PAL活性又明顯增加，到11月5日PAL活性達到峰值，12月份自然脫落的桑葉未檢測出PAL活性。
　　3、桑葉經霜前后類黃酮糖基轉移酶活性研究建立高效液相色譜法分析桑葉生合成途

6、徑參與黃酮類物質合成的最后1個關鍵酶類黃酮糖基轉移酶（UFGT）的活性，研究經霜前后桑葉中UFGT活性及動態(tài)變化規(guī)律。結果表明，在4、5月份桑葉UFGT活性較高，之后隨氣溫升高有所下降，9月份達到最低，經霜（10月23日）之后桑葉UFGT活性又明顯增加，到11月25日UFGT活性達到峰值，12月份自然脫落的桑葉未檢測出UFGT活性。
　　4、桑葉PAL、UFGT活性與黃酮類成分、氣候溫度的相關性分析采用SPSS20.0軟件分析桑葉