1、目的：盡管圓錐角膜的發(fā)生機(jī)制至今尚未徹底了解，尚未能從解除病因入手解決預(yù)防疾病，但是研究普遍認(rèn)為通過紫外光－核黃素角膜膠原交聯(lián)治療可以有效使角膜擴(kuò)張性疾病患者推遲甚至避免接受具有損傷性的手術(shù)治療。紫外光－核黃素角膜膠原交聯(lián)治療可以有效的提高角膜生物學(xué)，阻止角膜擴(kuò)張性疾病的進(jìn)展而受到廣泛青睞，但其作為一種新興治療方式，仍然具有一定的局限性。針對紫外光－核黃素角膜膠原交聯(lián)治療術(shù)在臨床應(yīng)用中亟待解決的問題進(jìn)行了某些基礎(chǔ)方面的研究。分別如下：探

2、討在不同輻照度紫外光－核黃素角膜膠原交聯(lián)術(shù)治療后，兔角膜生物力學(xué)改變的長期影響；通過長期觀察角膜膠原交聯(lián)術(shù)后角膜生物力學(xué)穩(wěn)定性改變，為指導(dǎo)紫外光－核黃素角膜膠原交聯(lián)能夠更快速并且安全的在臨床上應(yīng)用提供基礎(chǔ)依據(jù)。
　　方法：選健康日本大耳白兔25只，平均體重2.5~3.0Kg，隨機(jī)分成5組。將每組兔子的左眼作為實(shí)驗(yàn)眼，實(shí)驗(yàn)前測量中央頂點(diǎn)角膜厚度，隨后去除中央8-9mm直徑的角膜上皮，再次測量中央頂點(diǎn)角膜厚度，確保上皮去除干凈，用0.

3、22％的核黃素溶液點(diǎn)眼，每3分鐘滴1次，滴30分鐘。然后用370nm紫外光的照射，總能量保持5.4J/cm2不變，根據(jù)不同分組給予不同輻照度及照射時(shí)間組合：第1組用3 mW/cm2照射30分鐘,命名為3 mW組；第2組用18mW/cm2照射5分鐘，命名為18mW組；第3組30mW/cm2照射3分鐘，命名為30mW組；第4組去除上皮后滴30分鐘的核黃素溶液但無紫外光照射，命名為NUVA組；第5組作為空白對照組完全不處理。術(shù)后3個(gè)月測量中央

4、頂點(diǎn)角膜厚度，測量體重并記錄。于術(shù)后6個(gè)月測量中央頂點(diǎn)角膜厚度，并對兔子處以安樂死，取下眼球后立即進(jìn)行離體膨脹實(shí)驗(yàn)。將角膜制成附帶3-4mm鞏膜條帶的完整角膜樣本，固定于膨脹實(shí)驗(yàn)平臺(tái)；測量不同壓力下角膜前頂點(diǎn)的位移變化曲線，設(shè)為目標(biāo)曲線；有限元模擬角膜膨脹，輸出角膜模擬形變和壓力關(guān)系曲線，設(shè)為擬合曲線。借助優(yōu)化軟件(Ls-opt)逆向建模使得擬合與目標(biāo)曲線盡量貼合即RMS最小，借助數(shù)據(jù)分析軟件（Matlab）獲得角膜應(yīng)力、應(yīng)變和正切模量

5、值。所有結(jié)果采用SPSS22．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)以x±s表示。不同輻照度的角膜交聯(lián)術(shù)后正切模量及角膜厚度的比較采用重復(fù)測量方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：在低輻照度CXL組，兔角膜前頂點(diǎn)的位移-壓力曲線與空白對照組相比有明顯差異。空白對照組中，兔角膜前頂點(diǎn)位移-壓力曲線呈非線性，在低壓力階段，角膜前頂點(diǎn)的位移隨著壓力的增大而顯著增加,當(dāng)壓力增加到一定數(shù)值，角膜前頂點(diǎn)的位移改變開始緩慢。

6、而低輻照度/長時(shí)間紫外光照射CXL組(即3mW組)可觀察到，同一加壓數(shù)值下，低輻照度/長時(shí)間紫外光照射組位移較空白對照組明顯降低，并且低壓力階段的曲線長度較空白對照組明顯縮短。輻照度越低，兔角膜前頂點(diǎn)位移-壓力曲線顯得越低越平坦。觀察到在體兔角膜CXL術(shù)后6個(gè)月，兔角膜正切模量增加幅度隨紫外光輻照度的增加而降低。在不同應(yīng)力下(0.004Mpa，0.006Mpa,0.01Mpa)，3mW組相較于單純核黃素組（NUVA組）的角膜正切模量均有

7、顯著性升高（P＜0.05），增加比例為103.5%～177%。而18mW組、30mW組、NUVA組的正切彈性模量均較空白對照組無明顯差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：通過長期觀察發(fā)現(xiàn)，總能量保持不變，不同輻照度的角膜膠原交聯(lián)術(shù)后角膜的正切模量隨輻照度的增加而降低，并且長期研究觀察顯示這一數(shù)據(jù)改變穩(wěn)定。結(jié)果提示，一定范圍內(nèi)輻照度參數(shù)可使角膜膠原交聯(lián)產(chǎn)生效果，可以穩(wěn)定提高角膜生物力學(xué)性能，最佳角膜膠原交聯(lián)輻照度參數(shù)仍需進(jìn)一步長期觀察研