1、成骨細胞是起源于多能的骨髓間質(zhì)的基質(zhì)細胞,能夠增殖分化,形成骨細胞,并分泌骨質(zhì),是參與骨重建的重要細胞之一。細胞外鈣離子濃度([Ca2+]o)的升高可以誘導(dǎo)骨的形成。為了研究其機制,本文首先利用MTT比色的方法和Hoechst33342法檢測在不同細胞[Ca2+]o作用下,成骨細胞增殖和凋亡的情況。由于細胞增殖和凋亡與細胞內(nèi)鈣離子濃度([Ca2+]i)的變化有著重要的聯(lián)系,所以本文接著利用單細胞鈣離子熒光成像技術(shù)檢測成骨細胞[Ca2+]

2、o對于細胞[Ca2+]i變化的影響,并分析了細胞內(nèi)鈣離子變化的機制。
　　 通過用MTT比色法證明:分別用含5mM、10mM、20mM、40mM鈣離子濃度培養(yǎng)基的培養(yǎng),成骨細胞活力增加的比率分別為19.52％、18.64％、-17.96％、-37.19％。通過用Hoechst33342法證明,成骨細胞在含有40mM等高濃度鈣離子培養(yǎng)基培養(yǎng)下細胞活力降低系細胞凋亡所致。
　　 單細胞鈣熒光成像實驗結(jié)果表明:1、終濃度為5m

3、M、10mM、20mM、40mM的細胞外鈣離子都能夠引起成骨細胞[Ca2+]i的升高。并且細胞[Ca2+]o越高,引起細胞[Ca2+]i升高的幅度越大。2、在加入細胞[Ca2+]o刺激初始階段,尤其是在20mM、40mM濃度組的實驗中,細胞[Ca2+]i有一個明顯的短暫而迅速的上升的過程(第一上升階段),接著進入一個持續(xù)升高的過程(第二上升階段)。TMB-8(一種胞內(nèi)鈣釋放的抑制劑)可使第一上升階段細胞[Ca2+]i上升速度明顯變緩,第