1、植物細胞中，除了細胞核中具有遺傳物質DNA之外，葉綠體和線粒體也擁有半自主性的能自我復制和遺傳的基因組。隨著基因組測序技術的發(fā)展，越來越多的植物核基因組、葉綠體基因組和線粒體基因組相繼完成了測序。研究發(fā)現(xiàn)葉綠體基因組和線粒體基因組結構和序列信息在揭示物種起源、進化演變及其不同物種之間的親緣關系等方面具有重要價值；與此同時，比核轉化具有明顯優(yōu)勢的葉綠體轉化技術在遺傳改良、生物制劑的生產(chǎn)等方面顯示出巨大潛力，使得葉綠體基因工程成為植物基因工

2、程中發(fā)展的新領域。葉綠體基因組結構和序列分析則是葉綠體基因工程的基礎，而葉綠體基因工程研究又為細胞器與核基因組之間的基因轉移、基因表達的協(xié)調作用機制等研究提供實踐證明，對研究植物的進化起源有重要的意義。葉綠體基因工程技術也隨著葉綠體測序的完成逐漸成為轉基因定點整合、多拷貝高效表達外源基因，培育優(yōu)良性狀農作物品種和作為生物反應器合成目的蛋白的熱門選擇。本研究以小麥葉綠體基因組中的atpB和rbcL 作為同源重組片段，用nptII和gfp分

3、別作為篩選基因和標記基因，構建小麥葉綠體定點整合表達載體，用基因槍轟擊法分別轉化小麥的幼胚盾片和幼穗段。對T0代再生植株進行分子生物學驗證，PCR和Southern blot結果證實標記基因gfp已經(jīng)成功整合到葉綠體基因組中，并得到了同質化的再生植株。用T1代植株的葉片檢測到GFP綠色熒光在葉綠體中表達，證明已經(jīng)成功建立了小麥葉綠體穩(wěn)定遺傳轉化體系。應用植物細胞作為生物反應器生產(chǎn)藥用蛋白或疫苗等也成為現(xiàn)今研究的熱點，本研究用農桿菌浸染煙

4、草葉片的方法將人干擾素α-2b基因轉入煙草核基因組，在再生煙草植株的葉片蛋白中檢測到具有活性的人干擾素α-2b蛋白；構建了煙草葉綠體定點整合載體，為以煙草葉綠體表達人干擾素α-2b蛋白做好了前期準備。
　　 本文全面統(tǒng)計分析研究了已完成測序的藻類，苔蘚，蕨類，裸子，被子植物的各物種的核基因組和細胞器基因組的相關信息。分別比較了不同物種的基因組大小，基因編碼區(qū)和非編碼區(qū)的大小變化趨勢。在174種葉綠體基因組已測序的物種中，有26種

5、核基因組也完成了測序，分別比對各物種的葉綠體基因組和它的核基因組，結果發(fā)現(xiàn)隨著物種越來越高等，其葉綠體基因在核基因組中的同源性也越來越高，有5種被子植物的同源性高達100％。對15種線粒體基因組和核基因組都已測序的物種進行同樣的全序列比對，也發(fā)現(xiàn)了隨物種進化逐漸增高的趨勢，但與葉綠體相比，不是太明顯，最高的同源比例僅為82.6％。本文對藻類、雙子葉植物和單子葉植物的葉綠體的保守基因進行了統(tǒng)計。將單子葉植物保守基因中沒有的藻類的保守基因分

6、別與擬南芥和水稻的核基因組比對分析，其中絕大多數(shù)遺傳系統(tǒng)基因都成功轉移，而光合系統(tǒng)和生物合成系統(tǒng)則都丟失了相當一部分基因。還對擬南芥和水稻的葉綠體基因和線粒體基因在核基因組中的同源比例和拷貝數(shù)進行了統(tǒng)計。綜合分析這些序列的信息后，我們提出以下假設，在植物進化過程中，細胞器基因到核基因組的轉移，大致經(jīng)過了先以拷貝的形式轉移到核基因組的非編碼區(qū)，而后獲得表達功能，細胞器中相應基因的消失進而使細胞中的遺傳物質逐步轉移到核基因組中，最終實現(xiàn)核基