1、近30年來，隨著轉基因動物技術的迅猛發(fā)展，不僅給農(nóng)業(yè)和生物醫(yī)藥領域帶來了革命性的變化，同時也引起了一系列相關的問題，如轉基因動物及其產(chǎn)品的食用安全問題、倫理道德問題以及對生態(tài)環(huán)境的影響等。這些問題迫使世界各國都在加強對轉基因動物的管理工作，制定完善的有關轉基因動物及其食品安全的管理法規(guī)及標識制度。然而，這些法規(guī)制度的制定需要有健全的轉基因動物檢測體系來提供技術保障。本文主要從核酸水平對小鼠外源轉基因成分檢測技術進行了研究。 1)

2、轉基因陽性鼠的檢測采用一步法抽提鼠尾基因組DNA,得到OD值在1.7-1.9之間的高質量DNA，首先用普通PCR檢測得到陽性鼠，然后通過Southern雜交進行驗證。結果顯示：4個轉基因后代中3個檢測為陽性，一個沒有檢測到信號，但后面經(jīng)過熒光定量PCR和TAIL-PCR檢測證明，其也為轉基因陽性。 2)外源基因結構檢測建立多重PCR技術，在同一管中同時擴增一個內源基因和3個外源基因片段(包括外源目的基因、啟動子和終止子)，擴增得

3、到特異性好的4重PCR結果。表明此技術用于轉基因動物檢測可以大大提高工作效率和速度。 3)整合位點檢測根據(jù)插入外源基因5'端序列設計特異性引物和小鼠基因密碼子的偏好性設計隨機引物，用TAIL-PCR檢測4個轉基因founder小鼠F1代陽性小鼠的外源基因插入位點。得出2個轉基因小鼠的外源基因插入位點，分別插入在10號染色體的Sash1基因的第10內含子上和6號染色體Nxph1和AA545190基因間。 4)拷貝數(shù)檢測選擇