1、胰腺實(shí)性假乳頭狀瘤（pancreatic solid pseudopapillary neoplasm，SPN）是一種少見(jiàn)的具有惡性潛能的胰腺腫瘤。胰腺SPN發(fā)病率低，僅占胰腺腫瘤的1％-2％，多見(jiàn)于年輕女性。腫瘤起病隱匿，大部分患者無(wú)臨床癥狀，有癥狀的患者表現(xiàn)為腹部不適，惡心，嘔吐等，位于胰頭的SPN偶見(jiàn)黃疸。由于對(duì)此腫瘤的認(rèn)識(shí)不斷加深和影像學(xué)技術(shù)的改進(jìn)，胰腺SPN的檢出率在逐漸增加。胰腺SPN臨床少見(jiàn)，具有獨(dú)特的臨床表現(xiàn)和生物學(xué)行為

2、，然而目前相關(guān)基礎(chǔ)及臨床研究較少。
　　基因突變檢測(cè)目前已廣泛應(yīng)用于腫瘤的相關(guān)研究，對(duì)于揭示腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程起到了重要作用。新一代測(cè)序技術(shù)(next-generation sequencing technology,NGS)以高通量測(cè)序?yàn)樘攸c(diǎn)，包括全基因組測(cè)序和外顯子測(cè)序。外顯子測(cè)序是指利用目標(biāo)序列捕獲技術(shù)將基因組的全部外顯子區(qū)域DNA捕獲后并通過(guò)NGS技術(shù)進(jìn)行測(cè)序的方法。其測(cè)序過(guò)程稱為“循環(huán)芯片測(cè)序法”，是對(duì)布滿DNA樣品的芯

3、片重復(fù)進(jìn)行基于DNA的聚合酶反應(yīng)（模板變性、引物退火雜交及延伸）以及熒光序列讀取。外顯子測(cè)序針對(duì)性強(qiáng)，覆蓋度深，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性高，具有簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、高效等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于腫瘤疾病的研究中。
　　本研究對(duì)胰腺SPN新鮮組織樣本提取DNA，構(gòu)建DNA文庫(kù)并進(jìn)行高通量外顯子測(cè)序，初步篩選出突變基因共94個(gè)。進(jìn)一步對(duì)突變基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析和Sanger測(cè)序驗(yàn)證，證實(shí)CTNNB1是胰腺SPN的顯著突變基因。另對(duì)12個(gè)胰腺SPN腫瘤組織進(jìn)

4、行擴(kuò)大樣本PCR驗(yàn)證，結(jié)果表明CTNNB1的突變率為93.3％(14/15)。針對(duì)CTNNB1編碼的β-catenin蛋白共進(jìn)行了91例石蠟組織切片的免疫組織化學(xué)染色，共獲得有效染色87例，結(jié)果顯示共有72例組織切片為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為82.8％(72/87)。相關(guān)性分析表明β-catenin免疫組化陽(yáng)性表達(dá)程度與腫瘤直徑有相關(guān)性（P=0.029）。
　　此外，本研究回顧性分析2000至2010年之間所有接受手術(shù)并具有完整臨床病理資料

5、的病例。共入組100例病人，其中84例為女性，16例為男性，中位年齡31(13-68)歲。腫瘤平均直徑6.5(1.5-18) cm。共有24例患者診斷為惡性胰腺SPN。49例患者接受了淋巴結(jié)清掃，術(shù)后病理提示僅有4例患者有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。單因素分析表明，術(shù)前CT/MRI顯示胰周淋巴結(jié)腫大是惡性胰腺SPN的危險(xiǎn)因素（P=0.025）。遠(yuǎn)期隨訪結(jié)果顯示，共有兩名患者術(shù)后出現(xiàn)了肝轉(zhuǎn)移，并接受了肝轉(zhuǎn)移瘤切除術(shù)。兩名患者分別隨訪24和32個(gè)月，未出現(xiàn)