檸檬酸-EDC-NHS膠原凝膠修復破損纖維環(huán)的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  通過觀察比較組織學和影像學結果,探討利用檸檬酸-EDC/NHSⅠ型膠原凝膠修復鼠尾纖維環(huán)損傷,減緩椎間盤退變的效果。
  方法:
  使用提取于鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原凝膠,檸檬酸(CA)、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺(EDC)和N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)作為交聯(lián)劑,將Ⅰ型膠原凝膠與各交聯(lián)劑按質量比Col∶CA∶EDC∶NHS=50∶6∶12∶8(CA6)、Col∶CA∶EDC∶NHS=50∶

2、3∶12∶8(CA3)、Col∶CA∶EDC∶NHS=50∶0∶12∶8(CA0)混合制成Ⅰ型膠原混合凝膠。建立鼠尾椎間盤纖維環(huán)穿刺模型,使用清潔級SD大鼠,共48只,隨機分為假手術組(n=8)、CA-EDC/NHS凝膠(CA6)治療組(n=10)、CA-EDC/NHS凝膠(CA3)治療組(n=10)、EDC/NHS凝膠(CA0)治療組(n=10)、穿刺未治療組(n=10)。所有實驗動物尾椎間盤穿刺后,分別使用各實驗組對應的凝膠填充纖維

3、環(huán)破口。各實驗組所使用的混合凝膠均需要進行細胞毒性和生物相容性實驗。各組實驗動物分別于穿刺前和治療后1、2、4周行小動物X攝片、治療后1、2、4周行小動物MRI檢查,統(tǒng)計分析不同時間點椎間隙高度系數(shù)(%DHI)、髓核像素值以及改良Pfirrmann分級,并于第4周時將所有大鼠處死,取完整椎間盤標本進行H.E和番紅O染色,而后組織學照片,觀察比較髓核與纖維環(huán)改變。
  結果:
  1.穿刺4周后,CA-EDC/NHSⅠ型膠原凝

4、膠(CA6)治療組對比假手術組的鼠尾椎間盤,只發(fā)生了較為輕微的退變,髓核組織基本上保持的比較完整,并且通過觀察統(tǒng)計椎間盤高度系數(shù)、髓核像素值、改良Pfirrmann分級和組織學染色切片結果都要優(yōu)于其余兩個治療組(CA3、CA0)和穿刺未治療組。
  2.穿刺4周后,沒有加入檸檬酸的EDC/NHSⅠ型膠原凝膠(CA0)在各觀測結果中要遜色于兩個含有檸檬酸的治療組(CA6、CA3),但仍然優(yōu)于未治療組。
  3.通過觀察CA-E

5、DC/NHSⅠ型膠原凝膠(CA6)治療組的組織學結果,無顯著的軟骨終板以及周圍組織退變發(fā)生,沒有在穿刺針道的周圍發(fā)現(xiàn)炎性細胞浸潤和瘢痕組織,并且在針道的盡頭可見一團凝膠狀物質在斷裂的纖維環(huán)組織之間形成了橋接使其閉合。
  結論:
  1.大鼠鼠尾椎間盤纖維環(huán)在穿刺后,具有較差的自我修復能力,破損長期存在導致髓核組織逐漸流失,椎間隙高度下降。
  2.檸檬酸-EDC/NHSⅠ型膠原凝膠具有較低的細胞毒性,以及良好的生物相

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