1、為了探明施用甘蔗糖廠酒精廢液對土壤生物群落的影響，為科學施用甘蔗糖廠酒精廢液提供科學依據，本研究利用傳統(tǒng)的分離培養(yǎng)方法及PCR-DGGE分子標記技術，對在不同甘蔗糖廠酒精廢液處理條件下甘蔗各個生育時期的蔗田微生物數量及成熟期微生物群落DNA序列進行了分析，得到不同處理條件下的土壤微生物數量和DNA序列的多樣性之間的差異，并對影響土壤微生物群落的因素進行了探討。 本研究獲得的主要結論如下： 1．在甘蔗生育期內，施用酒精廢液

2、的處理土壤中細菌、真菌、放線菌及微生物總數均比不施酒精廢液的處理有明顯增加。 2．比較了兩種不同的土壤DNA提取方法，發(fā)現直接法的提取效率較高，且產量也高，為后期試驗提供良好的DNA模板。 3．對目的基因的PCR擴增進行了優(yōu)化，由于采用特殊的帶有“GC夾板”結構的引物，所以分別采用常規(guī)PCR及降落式PCR對16S-rDNA V3區(qū)進行擴增，結果顯示，降落式PCR方法在擴增中具有明顯的優(yōu)勢，不但提高了對目的產物擴增的特異性

3、，同時也使產量得以提高。 4．土壤微生物物種豐富度次序由高到低的順序為：75t/ha酒精廢液>105t/ha酒精廢液>45t/ha酒精廢液>CK2>CK1>75t/ha酒精廢液＋不種處理，各處理土壤間微生物群落相似性指數以45t/ha與75t/ha酒精廢液處理的最高，達41％；75t/ha酒精廢液＋不種與CK2、CK1與105t/ha酒精廢液處理之間的最低，為19％。UPGMA聚類也顯示了類似的結果，75t/ha和45t/ha酒