1、構筑多層有序膜的酶電極是實現酶電極穩(wěn)定性制備和深入發(fā)展的重要途徑，逐層自組裝技術(Layer-by-layer assembly,LBL assembly)可以進行有機超薄膜有序構筑，并具有操作簡單、膜厚度納米可控、膜結構和性能易于調節(jié)、適合成膜物質多等特點。因此，通過LBL方法交替組裝構筑酶多層膜及多層膜酶電極的研究具有重要意義。 論文研究了靜電組裝和生物識別組裝辣根過氧化酶(HRP)多層膜電極的構筑方法，并在金電極表面組裝

2、構筑了系列HRP多層膜電極，包括聚烯丙基胺鹽酸鹽(PAH)/HRP多層膜電極，有PAH/PSS(聚苯乙烯磺酸鈉)/PAH前體膜的單層和多層Con A(伴刀豆球蛋白)/HRP電極，HRP/GOx(葡萄糖氧化酶)雙酶多層膜電極，及預混合小分子染料耐爾藍(NB)的PSS-NB/HRP多層膜無試劑電極。研究制備的HRP電極用于過氧化氫、酚類化合物、胺類化合物分析檢測，具有靈敏度高、穩(wěn)定性好、抗干擾能力強等特點。 論文研究了靜電LBL組

3、裝構筑HRP多層膜電極，主要以HRP與聚電解質PAH靜電組裝構筑PAH/HRP多層膜酶電極，用AFM方法對PAH/HRP多層膜的表面形貌、粗糙度和均勻性進行表征分析。結果表明，以兒茶酚為底物，在組裝1-5個PAH/HRP雙層時，多層膜電極的響應隨著酶的組裝層數的增加而提高。實驗優(yōu)化電極制備和分析測定的條件，(PAH/HRP)<,5>電極對兒茶酚的線性范圍為6.0-120.0μmol1<'-1>，靈敏度為48.91 nA l μmol<'

4、-1>；常見葡萄糖和抗壞血酸對PAH/HRP的多層膜電極測定酚類物質沒有干擾；PAH/HRP多層膜電極對樣品消毒液回收率為98.7-109％。對于酚類化合物測定，靈敏度主要取決于分子中取代基的共軛給電子效應，取代基的共軛給電子效應越強靈敏度越大。 論文研究了生物識別組裝構筑了HRP單層和多層膜電極，在金電極表面組裝PAH/PSS/PAH前體膜，以ConA與HRP生物識別組裝構筑酶電極，用紫外-可見光譜表征了FITC-Con A

5、與HRP的逐層組裝過程；以兒茶酚為底物考察前體膜中的pH值和鹽度對組裝HRP電極催化電流的影響。結果表明，前體膜的組裝pH值和NaCl濃度分別為12.0和0.4 mol l<'-1>時，HRP電極的催化電流最大；在組裝1-4個Con A/HRP雙層時，多層膜電極的響應隨著酶的組裝層數的增加而提高。實驗優(yōu)化電極制備和分析測定的條件，(Con A/HRP)<,4>電極測定了一系列酚類物質的分析性能，對兒茶酚的線性范圍為6.0-48.0 μm

6、ol l<'-1>，靈敏度為162.79 nA l μmol<'-1>；生物識別組裝構筑的(ConA/HRP)<,4>電極的靈敏度(162.79 nA l μmol<'-1>)優(yōu)于靜電組裝構筑的(PAH/HRP)<,5>電極的靈敏度(48.91 nA l μmol<'-1>)。論文研究了生物識別作用組裝HRP/GOx雙酶多層膜電極，以ConA與HRP和GOx之間的生物識別構筑了HRP/GOx多層膜電極，AFM方法對不同組裝層膜的表面形貌

7、、粗糙度和均勻性進行表征分析。優(yōu)化電極制備和測定條件，(ConA/HRP)<,2>-(Con A/GOx)<,2>雙酶多層膜電極測定了酚類和芳香胺物質，對兒茶酚和對苯二胺的線性范圍分別為6.0-60.0和7.6-68.4 μmol l<'-1>，靈敏度分別為76.82和131.59 nAl μmol<'-1>；常見葡萄糖和抗壞血酸對測定酚類物質和芳香胺類物質不會產生干擾；由于在電極表面“原位”過氧化氫，降低了過氧化氫對組裝酶的抑制作用，

8、提高了HRP/GOx雙酶電極的穩(wěn)定性和重現性。 論文研究了小分子染料耐爾藍和聚電解質(PSS)預混合并與HRP靜電交替組裝的多層膜電極，用紫外-可見光譜對PSS-NB/HRP的逐層組裝過程進行了表征。研究了PSS-NB溶液中鹽度及組裝層數的影響，當PSS-NB溶液的鹽度為0.3 mol l<'-1>、兩個雙層(PSS-NB/HRP)修飾電極表面時，該電極對過氧化氫的響應線性范圍為0.20-7.03 mmol l<'-1>，靈敏