1、第一部分、丙酮法與凍干法提取泌尿系結(jié)石尿液蛋白差異性分析
　　目的：
　　探討丙酮沉淀法與凍干法提取泌尿系結(jié)石患者尿液蛋白的凝膠條帶差異。
　　方法：
　?。?）收集泌尿系結(jié)石男性患者和女性患者各2例晨起第一次尿液50ml，去除細(xì)胞碎片后分裝，-80℃凍存；
　?。?）使用凍干法和丙酮沉淀法富集尿液蛋白；
　?。?）Bradford法測量尿蛋白濃度；
　?。?）SDS-PAGE比較各組間蛋白；<

2、br>　　（5)Lane1D凝膠成像分析軟件分析二者蛋白凝膠光密度值，SPSS17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：
　　1、丙酮沉淀法提取泌尿系結(jié)石患者尿液蛋白濃度（0.92±0.13mg/ml）高于凍干法提取濃度（2.28±0.55mg/ml），二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)；
　　2、丙酮沉淀法提取泌尿系結(jié)石患者尿液蛋白凝膠約有4～7個(gè)蛋白條帶主要集中在55～95KD、20～34KD；凍干法提取蛋白凝膠約有3～

3、5個(gè)蛋白條帶，主要集中在72KD附近和26KD附近。
　　3、丙酮沉淀法提取泌尿系結(jié)石患者尿液蛋白凝膠平均光密度值(4.52×107±1.31×107），凍干法提取蛋白凝膠平均光密度值（3.03×107±0.79×107），二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　1、凍干法所提取尿液蛋白濃度高于丙酮沉淀法，且二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05)；
　　2、丙酮沉淀法提取尿液蛋白種類數(shù)目高于凍干法，但二者IOD值差

4、異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　第二部分、泌尿系草酸鈣結(jié)石和草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石尿液蛋白差異分析
　　目的：
　　探討泌尿系統(tǒng)草酸鈣結(jié)石、草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石患者尿液蛋白與健康人群尿液蛋白的差異性；
　　方法：
　?。?）收集健康成年男性和女性各2例，草酸鈣結(jié)石男性患者和女性患者各6例，草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石男性患者和女性患者各6例，晨起空腹第一次尿液50ml，去除細(xì)胞碎片后分裝凍存；
　?。?）使用

5、丙酮沉淀法提取各組實(shí)驗(yàn)樣本尿液蛋白；
　?。?）使用SDS-PAGE比較各組間蛋白凝膠條帶差異；
　?。?）數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：
　　1、男性各組蛋白濃度：CaOx組蛋白濃度1.91±0.46ug/ul，CaOx+CH組蛋白濃度2.04±0.87ug/ul，正常對(duì)照組蛋白濃度1.25±0.11ug/ul；各組間蛋白濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　2、女性各組蛋白濃度：CaOx組蛋白濃度1.61

6、±0.65ug/ul，CaOx+CH組蛋白濃度1.72±0.81ug/ul，正常對(duì)照組蛋白濃度1.07±0.45ug/ul；各組間蛋白濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3、泌尿系草酸鈣結(jié)石和草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石患者尿液蛋白凝膠有4～7個(gè)條帶，分子量主要集中在55～95KD和20～34KD附近，健康人群尿液蛋白凝膠有1～3個(gè)條帶，主要集中在72KD附近。
　　結(jié)論：
　　1、丙酮沉淀法提取草酸鈣結(jié)石、草酸鈣

7、混合碳酸磷灰石及健康人群尿液蛋白濃度無明顯差異；
　　2、泌尿系草酸鈣結(jié)石和草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石患者尿液蛋白種類高于健康人群，分子量主要集中在55～95KD和20～34KD附近。
　　第三部分、泌尿系草酸鈣結(jié)石和草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石相關(guān)尿液蛋白的定量分析
　　目的：
　　定量對(duì)比分析健康人群和草酸鈣結(jié)石、草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石患者尿液中OPN、THP、NGAL、Albumin和α-1-microglob

8、ulin的含量；
　　方法：
　?。?）收集健康成年男性和女性各10例，草酸鈣結(jié)石男性患者（n=16）和女性患者（n=13），草酸鈣混合碳酸磷灰石結(jié)石男性患者（n=13）和女性患者（n=16），晨起空腹第一次尿液50ml，去除細(xì)胞碎片后分裝，-80℃凍存；
　?。?）Luminex液相芯片檢測系統(tǒng)分析各組樣本內(nèi)各蛋白濃度。
　?。?）數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：
　　1、THP：
　?。?）男性組各組

9、間數(shù)據(jù)對(duì)比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；
　?。?）女性組：正常組（8.46±1.64ug/ml）對(duì)比CaOx組（1.91±0.43ug/ml）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);正常組對(duì)比CaOx+CH組（1.98±0.37ug/ml）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);
　　2、NGAL：
　?。?）男性組：正常組（63.32±12.23ng/ml）對(duì)比 CaOx組（427.79±90.17ng/ml）差異有統(tǒng)計(jì)

10、學(xué)意義（P<0.05);正常組對(duì)比 CaOx+CH（196.93±38.50ng/ml）組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);
　?。?)女性組：正常組（30.32±3.92ng/ml）對(duì)比CaOx組（503.82±174.35ng/ml）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);正常組對(duì)比CaOx+CH（552.85±156.78ng/ml）組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);
　　3、AMBP：男女各組間數(shù)據(jù)對(duì)比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

11、（P<0.05）；
　　4、Albumin：
　　（1）男性組：正常組(48.17±6.21ug/ml)對(duì)比CaOx組(309.38±33.44ug/ml)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);正常組對(duì)比CaOx+CH組(194.20±33.85ug/ml)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);
　?。?)女性組：正常組（33.55±3.51ug/ml）對(duì)比CaOx組（80.69±8.78ug/ml）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.

12、05);正常組對(duì)比CaOx+CH組（91.72±9.60ug/ml）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);
　　5、OPN:
　　（1）男性組：正常組（4.65±0.99ug/ml）對(duì)比CaOx組（1.15±0.40ug/ml)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);正常組對(duì)比CaOx+CH組（0.90±0.12ug/ml)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05);
　?。?)女性組：正常組（1.82±0.28ug/ml)對(duì)比CaOx組