帕金森病患者血漿外泌體的分離鑒定及miRNA表達譜分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:
  microRNA(miRNA)是一種小的非編碼RNA,通過促進靶mRNA降解或抑制其翻譯起到轉錄后調節(jié)作用,近年來有研究報道m(xù)iRNA參與帕金森?。≒arkinson'sdisease,PD)的發(fā)生發(fā)展,且某些差異表達的miRNA有助于PD的診斷。
  目的:
  對比分析PD患者與對照者血漿外泌體中的miRNA,并進行靶基因預測及KEGG通路分析,以尋找出有意義的miRNA。
  方法:
  

2、1、分別收集13例散發(fā)性PD患者及與其年齡性別相匹配的健康對照者的血漿樣本。
  2、用Invitrogen試劑盒從血漿中分離外泌體,通過qNano測定濃度及大小分布,Westernblot檢測外泌體標記蛋白CD63、Alix的表達以對其進行鑒定。
  3、使用高通道測序檢測兩組血漿外泌體miRNA的表達差異。
  4、使用miRNA靶基因預測軟件對miR-10a-5p、miR-485-5p、miR-15b和miR-1

3、95進行靶基因預測,并對預測的靶基因進行KEGG通路分析。
  結果:
  1、從血漿中分離出mode直徑<100nm、表達外泌體標記蛋白CD63和Alix的粒子,鑒定為外泌體。
  2、在表達明顯差異(Ratio>2.0,P<0.05)的miRNA中,與對照組相比,PD組以上調為主(65.3%)。
  3、miR-10a-5p、miR-485-5p、miR-15b和miR-195預測的靶基因均參與神經營養(yǎng)因子信

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