1、目的：1.探討人臍帶間充質干細胞（human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells, hUCMSCs）的體外分離、培養(yǎng)的方法，觀察其生物學特性；2.探討絲素蛋白多孔支架與hUCMSCs共培養(yǎng)構建組織工程脂肪的可行性。
　　方法：1.從新鮮的人臍帶中獲取華通氏膠，組織塊法提取人臍帶間充質干細胞，倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，MMT法檢測并繪制細胞生長曲線，流式細胞儀檢測細胞表面特征性標記，成脂誘

2、導培養(yǎng)21天，油紅O染色觀察成脂情況；2.hUCMSCs細胞接種于絲素蛋白多孔支架，觀察細胞黏附率，MTT法測定及熒光染色觀察細胞在支架上的生長情況，成脂誘導培養(yǎng)后RT-PCR檢測細胞在支架上的成脂分化能力，將經成脂誘導培養(yǎng)后的細胞支架復合物接種于S-D大鼠體內，觀察細胞支架復合物在體內的成脂能力。
　　結果：1.體外培養(yǎng)2周，組織塊周圍有梭形細胞游出；傳代培養(yǎng)至第10代，細胞形態(tài)與增殖能力無明顯變化；流式細胞儀檢測CD44、CD

3、105陽性，CD14、CD34陰性。成脂誘導培養(yǎng)后表明hUCMSCs具有成脂能力，油紅O染色見細胞質中有紅染的脂滴聚集。2.細胞在絲素蛋白多孔支架上有良好的黏附率，12h后平均黏附率超過80％。MTT法檢測顯示接種于絲素蛋白多孔支架上的細胞與貼壁培養(yǎng)的細胞生長曲線無統(tǒng)計學差異。熒光倒置相差顯微鏡下觀察到，細胞與絲素蛋白支架共培養(yǎng)1～2天后細胞與支架充分附著，培養(yǎng)7～10天后生長活躍。共培養(yǎng)1周后序貫成脂誘導培養(yǎng)2周，RT-PCR檢測細胞

4、Oct-4表達減弱，表達aP2和LPL。將共培養(yǎng)1周序貫成脂誘導培養(yǎng)2周的細胞支架復合物植入S-D大鼠皮下，4周后取出，見有脂肪組織形成；8周后支架降解明顯，有新生脂肪組織形成；12周后支架降解完全，脂肪組織形成明顯；對照組無明顯脂肪組織生成。
　　結論：1. hUCMSCs能在體外培養(yǎng)、擴增及表現(xiàn)間充質干細胞的生物特性；2. hUCMSCs具有向脂肪細胞方向分化的特性，可作為脂肪組織工程的種子細胞；3.絲素蛋白多孔支架與細胞共培