1、目的：
　　檢測長鏈非編碼RNA母系表達(dá)基因3（maternally expressed gene3 MEG3）在小兒先天性巨結(jié)腸（Hirschsprung’s disease HD）病變腸管中的表達(dá)情況，并通過觀察過表達(dá)MEG3對人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株（SK-N-BE(2)）增殖、克隆、侵襲及凋亡的影響，探討MEG3在HD中的作用及作用機制。
　　方法：
　　用RT-qPCR方法檢測17例HD患兒病變結(jié)腸組織和17例非

2、HD也無腸道畸形嬰兒正常結(jié)腸組織中MEG3的表達(dá)量，用PASS檢測其效能，并用ROC曲線下面積（AUC）及95％可行區(qū)間表示MEG3在HD中的診斷效能，評價MEG3在HD中的診斷價值。應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染技術(shù)，在SK-N-BE(2)細(xì)胞中轉(zhuǎn)染MEG3過表達(dá)質(zhì)粒，設(shè)立MEG3高表達(dá)組、空載體組及對照組，并應(yīng)用CCK-8、Edu細(xì)胞增殖實驗、平板克隆技術(shù)、TRANSWELL技術(shù)、流式細(xì)胞實驗分別檢測過表達(dá)MEG3對SK-N-BE(2)細(xì)胞的增

3、殖能力、克隆能力、侵襲能力及凋亡情況的影響。
　　結(jié)果：
　　RT-qPCR結(jié)果顯示：HD患兒病變結(jié)腸組織中MEG3表達(dá)量較正常結(jié)腸組織中MEG3表達(dá)量明顯升高（P<0.01），效能檢測顯示效能達(dá)標(biāo)，實現(xiàn)100%的檢測功率，ROC曲線顯示：曲線下面積（AUC）為84.9%，（95%可行區(qū)間71.6%-98.3%），最佳陽性截斷值(cut off value)為1.46，靈敏度為82.4%，特異度為82.4%。MEG3過表達(dá)質(zhì)

4、粒轉(zhuǎn)染SK-N-BE(2)細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率為35.4%，達(dá)到轉(zhuǎn)染要求，MEG3過表達(dá)組細(xì)胞的增殖能力、克隆能力以及侵襲能力與空載體組及對照組比較明顯降低（P<0.01），流式細(xì)胞檢測顯示：MEG3高表達(dá)組與空載體組及對照組比較細(xì)胞凋亡明顯增加（P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　HD患兒病變結(jié)腸組織中MEG3表達(dá)量明顯升高，MEG3可能通過調(diào)控SK-N-BE(2)細(xì)胞的增殖、克隆、侵襲與凋亡參與HD的發(fā)病，在HD的早期診斷與治療