1、目的：比較脾虛證患者和健康人酸刺激前后唾液分泌和唾液淀粉酶活性的差異，探討兩者酸刺激前后sAA活性差異的機(jī)制，為“脾主涎”理論和脾虛證的臨床診斷提供依據(jù)。
　　方法：1.臨床實(shí)驗(yàn)：征集脾虛證患者與健康人各30例，定時采集他們檸檬酸刺激前后的全唾液樣本，測定唾液流率、pH值和總蛋白含量，測定sAA活性、sAA含量和AMY1拷貝數(shù)。（1）比較脾虛患者和健康人刺激前的和刺激后的唾液樣本各測定值，再分別比較兩組刺激前后各測定值的差異性。（

2、2）分析兩組sAA活性與sAA含量、AMY1拷貝數(shù)之間的相關(guān)性。2.動物實(shí)驗(yàn)：(1)選取SD大鼠雌性30只，建立大鼠酸刺激前后唾液采集方法；（2）另選取48只SD雌性大鼠，SPF級條件飼養(yǎng)。隨機(jī)分為脾虛模型組(n=24)和正常對照組(n=24)，脾虛模型采用利血平法復(fù)制。采集兩組大鼠酸刺激前后全唾液樣本并測定其sAA活性。（3）隨機(jī)將脾虛大鼠分為脾虛對照組、脾虛+激動劑組、脾虛+阻斷劑組，隨機(jī)將正常大鼠分為正常對照組、正常+激動劑組、正

3、常+阻斷劑組。采集大鼠酸刺激前后全唾液并測定其sAA活性。取完唾液樣本即刻解剖摘取腮腺組織，測定腮腺組織sAA活性、 sAA含量、cAMP含量、β-AR受體表達(dá)量。①組內(nèi)比較兩組大鼠酸刺激前后的唾液樣本差異性，組間比較脾虛大鼠和正常大鼠刺激前的和刺激后的唾液樣本。②組間比較脾虛對照組和正常對照組腮腺組織的各測定指標(biāo)的差異性。③觀察激動劑和阻斷劑對兩組大鼠的干預(yù)作用。
　　結(jié)果：1.臨床實(shí)驗(yàn)：（1）①脾虛患者刺激前的唾液樣本除了在

4、pH值上比健康人的顯著高，其它沒有顯著差異；脾虛患者酸刺激后的唾液樣本的流率、總蛋白含量、sAA活性、sAA比活和sAA含量顯著低于健康人的，但pH值無差異；脾虛患者和健康人的AMY1拷貝數(shù)沒有顯著差異；②脾虛患者酸刺激前后各指標(biāo)差異不顯著，除總蛋白含量比值小于1，其余各指標(biāo)酸刺激前后比值均略大于1；而健康人的刺激前后各指標(biāo)差異顯著，各指標(biāo)酸刺激后比酸刺激前比值均大于1。兩組sAA活性比值差異顯著。
　?。?）兩組唾液樣本的sAA

5、活性和sAA含量之間存在顯著的正相關(guān)（健康人刺激前r=0.61，刺激后r=0.67；脾虛患者刺激前r=0.69，刺激后r=0.72），刺激前的sAA活性與AMY1拷貝數(shù)顯著相關(guān)（健康人r=0.52，脾虛患者r=0.51），刺激后無相關(guān)性。兩組的sAA活性比值與sAA含量比值之間存在顯著相關(guān)性（健康人r=0.85；脾虛患者r=0.36），然而，健康人sAA活性比值與AMY1拷貝數(shù)無顯著相關(guān)性，而脾虛患者則有顯著相關(guān)性（r=0.45，P<0

6、.05）。
　　2.動物實(shí)驗(yàn)：（1）大鼠唾液樣本采集方法探索，結(jié)果得出以0.4 mol/L0.50×0.50 cm檸檬酸濾紙，每隔2.5 min刺激大鼠舌尖30 s，采集酸刺激后全唾液的方法，能顯著增加大鼠sAA活性和流率（P<0.05），刺激前sAA活性與流率有顯著正相關(guān)性（P<0.05），刺激后sAA活性與流率有顯著負(fù)相關(guān)性（P<0.05）。
　?。?）脾虛大鼠建模11天的體重變化比較健康大鼠顯著下降，建模第11天出現(xiàn)典

7、型脾虛癥狀，脾虛大鼠表現(xiàn)為雙目懶睜、扎堆、弓背、毛色不澤、大便溏軟。
　?。?）①脾虛大鼠刺激前后無顯著差別，正常大鼠則顯著增加；兩組刺激前的樣本無顯著差異性，刺激后的差異顯著。②比較兩組腮腺的各項(xiàng)指標(biāo)，脾虛大鼠腮腺中的sAA活性和sAA含量顯著高于正常大鼠，β1-AR表達(dá)顯著降低，β2-AR表達(dá)顯著高，cAMP含量顯著降低。③激動劑能顯著增加兩組大鼠唾液的sAA活性，顯著降低兩組大鼠腮腺的sAA活性和sAA含量，對cAMP、β-